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Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3-Cas9-562培養(yǎng)

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更新時(shí)間:2017-09-07 12:03:11瀏覽次數(shù):109次

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Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3-Cas9-562培養(yǎng)來(lái)源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等品牌),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無(wú)菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3-Cas9-562培養(yǎng)凍保存方法一:冷凍管置于4300分鐘→(-2030分鐘*)→-8016~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。 
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3–80以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80冰箱中,但存活率稍微降低一些。 
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細(xì)胞活力狀態(tài)良好的細(xì)胞株1420株,其中絕大部分是近年來(lái)從美國(guó)ATCCNIH分批引進(jìn)的細(xì)胞種子,少部分來(lái)自全國(guó)各地細(xì)胞研究所,細(xì)胞來(lái)源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好。凍保存方法一:冷凍管置于4300分鐘→(-2030分鐘*)→-8016~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。

產(chǎn)品名稱

生長(zhǎng)特性

貨期

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3-Cas9-562培養(yǎng)

貼壁生長(zhǎng)

35

細(xì)胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3-Cas9-562培養(yǎng)
形態(tài)特性   上皮樣
生長(zhǎng)特性   貼壁生長(zhǎng)
特征特性    該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使SK-OV-3細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件   McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法   1:2~1:6傳代;每周2~3次。
傳代情況  C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 
支原體檢測(cè)  培養(yǎng)法(- 
STR   Amelogeninx,x;CSF1PO11,11;D12S39122,22;D13S3178,11;D16S53912,12;D18S5116,17,18;D19S43314,14.2;D21S1130,31,31.2;D2S133818,23D3S135814,14;D5S81811,11D6S104312,12;D7S82013,14;D8S117914,15FGA24,26;Penta E5,13;TH019,9.3;TPOX8,11vWA17,19
同工酶

染色體

使用權(quán)限 A 
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3-Cas9-562培養(yǎng)復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段(-5~0)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3-Cas9-562培養(yǎng)操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37溫箱培養(yǎng)。
PDCD1LG2 Others Cynomolgus 食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0172NR8383(大鼠肺泡巨噬細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人無(wú)色素睫狀上皮細(xì)胞裂解物HNPCEpiCL

M453細(xì)胞,人癌細(xì)胞 鼠肉瘤細(xì)胞,S-180-S2D9細(xì)胞 卵巢癌組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml

B16-F10(小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

NHEM M2 adult Pellet 正常人表皮黑素細(xì)胞團(tuán)塊(捐獻(xiàn)者),培養(yǎng)在M2培養(yǎng)液中 > 1 mio.cells 人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HRGECL
rEPC,大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓 Rattus

CM-H112人脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人成纖維細(xì)胞(HMF)(5×105)

小鼠漿細(xì)胞瘤;MPC-11 小鼠直腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

人骨肉瘤細(xì)胞;HOS

EPHA6 Others Mouse 小鼠 EPHA6 / EHK-2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人肺粘液上皮樣癌細(xì)胞;NCI-H292

人表皮角質(zhì)細(xì)胞-(HEK-a) ( 5×105 )

大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)

人鼻咽癌細(xì)胞;CNE-2Z 大鼠腎上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

NG108-15 大鼠小鼠雜合神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞

IL2RA Others Mouse 小鼠 IL2RA / CD25 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
鹽胱酸增菌液SC20/包用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)

假單胞分離肉湯 250g 用于假單胞菌群增菌培養(yǎng)

YM11瓊脂 YM11 Agar 250 濾膜法用于霉菌、酵母菌的分離培養(yǎng)(NEOGEN方法)

Eugon瓊脂250g/瓶廣泛用于微生物的培養(yǎng)incubationmediaEugon瓊脂250g/瓶廣泛用于微生物的培養(yǎng)

ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基2406g滅菌后冷至45℃左右時(shí)加入5%脫纖維羊血,用于空腸彎曲菌的培養(yǎng)。(CP、GB、EP、USP)

4651 CM 軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 4651 CM 軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml

紫晶口磨 提高酒的含酯量,生香味 /

BETA-SSA瓊脂250g用于鏈球菌的選擇性分離培養(yǎng)

Cary-Blair氏*(不含瓊脂) 250g 用于運(yùn)送腸道致病菌。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3-Cas9-562培養(yǎng)鹽胨水培養(yǎng)基250g用于鹽還原產(chǎn)氣試驗(yàn)

乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基 250(g) incubation media 乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基 250(g)

V-P半固體瓊脂 Voges-Proskauer Semisolid Agar 250 細(xì)菌V-P試驗(yàn)

察氏瓊脂250用于青霉、曲霉鑒定及保存菌種用incubationmedia察氏瓊脂250用于青霉、曲霉鑒定及保存菌種用

GN增菌液(10ml) 10ml*20 主要用于志賀氏菌的增菌培養(yǎng),亦可用于沙門氏菌增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3-Cas9-562培養(yǎng)現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。

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