Cas9穩(wěn)定表達的人結(jié)直腸腺癌細胞；HCT116-Cas9-566培養(yǎng)質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，進口來源，保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
細胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達的人結(jié)直腸腺癌細胞；HCT116-Cas9-566培養(yǎng)
形態(tài)特性   上皮樣；多角
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細胞是采用慢病毒感染的方式使HCT116細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Puromycin，經(jīng)2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件   IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS；2ug/ml Puromycin
傳代方法  1:3傳代；3~4天1次。　
傳代情況  C3
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養(yǎng)法（-）　
STR   Amelogenin：x,x；CSF1PO：7,10；D12S391：17,21；D13S317：10,12；D16S539：11,13；D18S51：17,17；D19S433：12,13；D21S11：29,30；D2S1338：16,16；D3S1358：12,19；D5S818：10,11；D6S1043：13,13；D7S820：11,12；D8S1179：12,14；FGA：18,23；Penta E：13,14；TH01：8,8；TPOX：8,8；vWA：17,22；
同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達的人結(jié)直腸腺癌細胞；HCT116-Cas9-566培養(yǎng)細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
CD84 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD84 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0164NAMALWA(人Burkitt's淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2

人心臟成纖維細胞-心室裂解物HCF-av L

CCD-1095Sk細胞，人浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細胞 鼠肝癌細胞,H22-H8D8細胞 腦成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

BC3H1(小鼠腦瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

HUASMC Pellet 人臍動脈平滑肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人前列腺上皮細胞裂解物HPEpiCL
MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞 Mouse

CM-R008大鼠支氣管成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL

人臍帶間葉干細胞(臍帶)(HUMSC) (5×105)

小鼠腎足細胞;Mouse podocyte 小鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

人腦瘤細胞;SF17

GPA33 Others Mouse 小鼠 GPA33 / Glycoprotein A33 人細胞裂解液 (陽性對照)
人皮膚成纖維樣細胞;HSF2

人腸平滑肌細胞(HISMC)( 5×105 )

CL-0366IAR20(大鼠肝細胞)5×106cells/瓶×2

人肺癌細胞;A-427 [A427] 大鼠破骨細胞*培養(yǎng)基 100mL

EL4.IL-2 小鼠淋巴瘤細胞

MET Others Mouse 小鼠 c-MET / HGFR 人細胞裂解液 (陽性對照)
含225mlGN增菌液均質(zhì)袋用于志賀氏菌的增菌培養(yǎng)，亦可用于沙門氏菌增菌培養(yǎng)。

BacterialorganophosphorusMedium

苯*脫氨酶培養(yǎng)基 Phenylalanine Deaminase Medium 100 用于苯*脫氨酶試驗

改良Letheen肉湯基礎(chǔ)250g/瓶用于化妝品衛(wèi)生微生物檢測(ISO)，每升培養(yǎng)基中需添加0204incubationmedia改良Letheen肉湯基礎(chǔ)250g/瓶用于化妝品衛(wèi)生微生物檢測(ISO)，每升培養(yǎng)基中需添加0204

PALCAMAgar
BLAgarMedium

42℃生長培養(yǎng)基 42℃growth Medium 用于副溶血性弧菌42℃生長試驗(SN標準)

無菌豬血清 Sterile Defidrinated Pig Blood 100毫升 BR

改良GAM瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于厭氧菌培養(yǎng)，每培養(yǎng)基中添加22可選擇性添加222各ncubationmedia改良GAM瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于厭氧菌培養(yǎng)，每培養(yǎng)基中添加22可選擇性添加222各1支

MI培養(yǎng)基 1000ml 用于濾膜法計數(shù)飲用水中大腸埃希氏菌和大腸菌群
Cas9穩(wěn)定表達的人結(jié)直腸腺癌細胞；HCT116-Cas9-566培養(yǎng)鹽煌綠增菌液基礎(chǔ)250g

艾格瓊脂 250g 用于生產(chǎn)過程中無菌監(jiān)測(Acumedia方法)

TMP瓊脂培養(yǎng)基 TMP Agar 250 用于*的分離培養(yǎng)

蛋白胨水培養(yǎng)基250g/瓶用于細菌靛基質(zhì)試驗incubationmedia蛋白胨水培養(yǎng)基250g/瓶用于細菌靛基質(zhì)試驗

改良Skirrow氏瓊脂平板(9cm) 10個/包 用于彎曲桿菌的分離培養(yǎng)
Cas9穩(wěn)定表達的人結(jié)直腸腺癌細胞；HCT116-Cas9-566培養(yǎng)培養(yǎng)溫馨提示：
1）公司努力實現(xiàn)為科學(xué)研究提供實驗細胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實驗細胞及其子代，不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2）公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關(guān)信息進行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件，中心不保證其準確性。
3）從文獻等處引用的信息本中心未進行核實，僅供參考。
4）使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī)，充分考慮可能存在的風險和責任，采取適當?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。