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更新時間:2017-09-07 11:57:53瀏覽次數:146次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網Cas9穩(wěn)定表達的人結直腸腺癌細胞;HCT116-Cas9-568圖片凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細胞活力狀態(tài)良好的細胞株1420株,其中絕大部分是近年來從美國ATCC和NIH分批引進的細胞種子,少部分來自全國各地細胞研究所,細胞來源可靠,背景資料清晰,代數年輕,活力好。凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
產品名稱 | 生長特性 | 貨期 |
貼壁生長 | 3-5天 |
細胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達的人結直腸腺癌細胞;HCT116-Cas9-568圖片
形態(tài)特性 上皮樣;多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使HCT116細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Puromycin,經2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆,經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS;2ug/ml Puromycin
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:7,10;D12S391:17,21;D13S317:10,12;D16S539:11,13;D18S51:17,17;D19S433:12,13;D21S11:29,30;D2S1338:16,16;D3S1358:12,19;D5S818:10,11;D6S1043:13,13;D7S820:11,12;D8S1179:12,14;FGA:18,23;Penta E:13,14;TH01:8,8;TPOX:8,8;vWA:17,22;
同工酶
染色體
使用權限 A類
Cas9穩(wěn)定表達的人結直腸腺癌細胞;HCT116-Cas9-568圖片復蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
Cas9穩(wěn)定表達的人結直腸腺癌細胞;HCT116-Cas9-568圖片操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0160Molt-4(人急性淋巴母細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2
人主動脈平滑肌細胞裂解物HASMCL
SK-HEP-1細胞,人肝癌細胞 人低轉移肺癌細胞,95-C細胞 腦動脈血管內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-1
TIMP1 Others Human 人 TIMP-1 / TIMP1 人細胞裂解液 (陽性對照)
CSC, 小鼠心肌細胞 Mouse
CM-R024大鼠淋巴成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
人脂肪間充質干細胞(脂肪)(HMSC-ad)(5×105)
小鼠腎集合管細胞(SV40轉化);M-1 小鼠小腸血管內皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
人紅系白血病細胞;TF-1
SPARC Others Mouse 小鼠 SPARC / BM-40 人細胞裂解液 (陽性對照)
人子宮內膜腺癌細胞;HEC-1-B
人成纖維母細胞-(HDF-a)( 5×105 )
人星形膠質細胞
人結直腸腺癌細胞;LoVo 大鼠輸尿管上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
PC-12(高分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化)
SLAMF6 Others Human 人 Ly108 / SLAMF6 人細胞裂解液 (陽性對照)
志賀氏菌增菌肉湯250g用于志賀氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)
Inorganicphosphorusbacteria
標準I號營養(yǎng)瓊脂 Standard I Nutrient Agar 250 標準細菌計數、含糖(MERCK方法)
Letheen肉湯基礎250g/瓶用于化妝品衛(wèi)生微生物檢測,每升培養(yǎng)基中需添加0204incubationmediaLetheen肉湯基礎250g/瓶用于化妝品衛(wèi)生微生物檢測,每升培養(yǎng)基中需添加0204
OxfordAgarBase
苯丙酸培養(yǎng)基2300g用于鑒別細菌利用銨鹽作為*氮源并分解葡萄糖的試驗。
4201-prf MCM-prf 腎系膜細胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 4201-prf MCM-prf 腎系膜細胞培養(yǎng)基 500 ml
10%TrypticaseSoyBroth
乙基紫肉湯(litsky肉湯)250g用于鏈球菌增菌培養(yǎng)
YNB培養(yǎng)基 100g 用于基因工程中酵母菌的發(fā)酵培養(yǎng)
Cas9穩(wěn)定表達的人結直腸腺癌細胞;HCT116-Cas9-568圖片鹽肉湯250g用于蠟樣芽孢桿菌鹽還原試驗(SN標準)
腸道菌計數瓊脂(VRBDA) Violet Red Bile Dextrose Agar 用于腸道菌計數和腸桿菌科鑒別
Kovacs氏靛基質試劑盒 10ml*2 用于吲哚(靛基質)試驗配套試劑
6.5%氯葡萄糖瓊脂250g/瓶用于腸球菌確證和培養(yǎng)incubationmedia6.5%氯葡萄糖瓊脂250g/瓶用于腸球菌確證和培養(yǎng)
月桂基鹽胰蛋白胨MUG培養(yǎng)基 250g 用于O157菌檢測,不含MUG(SN標準)
Cas9穩(wěn)定表達的人結直腸腺癌細胞;HCT116-Cas9-568圖片現貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現貨,質量保證,公司所有產品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。
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