細(xì)胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞；EC109-Cas9-570培養(yǎng)
形態(tài)特性   上皮樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使EC109細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；400ug/ml G418
傳代方法  1:3傳代；2~3天1次。　
傳代情況  C3
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)  培養(yǎng)法（-）　
STR   Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,10；D12S391：19,20；D13S317：11,11；D16S539：12,12；D18S51：12,16；D19S433：13,13；D21S11：30,30；D2S1338：17,20；D3S1358：17,17；D5S818：12,12；D6S1043：13,13；D7S820：8,12；D8S1179：13,14；；FGA：25,25；Penta E：16,16；TH01：9,9；TPOX：8,8；vWA：16,17；
同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞；EC109-Cas9-570培養(yǎng)質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，進(jìn)口來源，保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞；EC109-Cas9-570培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞；EC109-Cas9-570培養(yǎng)培養(yǎng)溫馨提示：
1）公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代，不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
2）公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對(duì)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新。但限于我們的技術(shù)條件，中心不保證其準(zhǔn)確性。
3）從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí)，僅供參考。
4）使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時(shí)候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī)，充分考慮可能存在的風(fēng)險(xiǎn)和責(zé)任，采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對(duì)健康或環(huán)境的危害。

CD83 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD83 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

CL-0156MFC(小鼠胃癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人肝臟細(xì)胞裂解物HHL

UACC812細(xì)胞，人導(dǎo)管瘤細(xì)胞 鼠腹水瘤,EAC-E2G8細(xì)胞 腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

BEL-7405(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HPASMC Pellet 人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人肝臟細(xì)胞裂解物HHL
MLF, 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞 Mouse

CM-R040大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

19. 干細(xì)胞系統(tǒng)

小鼠T淋巴細(xì)胞;Cl.Ly1+2-/9 小鼠肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW480 [SW 480;SW-480]

FZD10 Others Mouse 小鼠 FZD10 / Frizzled-10 / CD350 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A-375 [A375]

人成纖維母細(xì)胞-新生兒(HDF-n)( 5×105 )

mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞

人口腔表皮樣癌細(xì)胞;KB 大鼠尿道上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

PC-12(低分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化)

DLL1 Others Mouse 小鼠 DLL1 / Delta-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
Kovcas氏靛基質(zhì)試劑盒5ml*2吲哚(靛基質(zhì))試驗(yàn)配套試劑

Nitrogen-fixingbacteriawiththeASugai’smedium

波爾頓選擇性增菌肉湯 Bolton Selective Enrichment broth 250 用于彎曲桿菌選擇性增菌培養(yǎng)(Merck方法)

菌種培養(yǎng)基250g/瓶用于菌種培養(yǎng)與保存，可制備菌種保存斜面(pH6.5)incubationmedia菌種培養(yǎng)基250g/瓶用于菌種培養(yǎng)與保存，可制備菌種保存斜面(pH6.5)

RoseBengalMedium
3%氯三糖鐵瓊脂2550g用于副溶血性弧菌的生化反應(yīng)。(GB、SN)

4121-prf EpiCM-2-prf 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基-2 500 ml incubation media 4121-prf EpiCM-2-prf 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基-2 500 ml

Trypticase(Tryptic)SoyBroth

6.5%NaClDextroseAgar

TM培養(yǎng)基 250g 用于淋球菌的分離培養(yǎng)(Quelab方法)
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞；EC109-Cas9-570培養(yǎng)鹽增菌液(SF)250g用于增殖標(biāo)本中的沙門氏菌

GC瓊脂 250g 用途:用于淋球菌的分離培養(yǎng)。

氯三糖鐵 NaCl Triple Sugar Iron Agar 250 用于副溶血性弧菌的生化反應(yīng)篩選(SN標(biāo)準(zhǔn))

5000ml/瓶incubationmedia5000ml/瓶

BoltonBrothSupplement