Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞；EC109-Cas9-572圖片質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，進(jìn)口來源，保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
細(xì)胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞；EC109-Cas9-572圖片
形態(tài)特性   上皮樣
生長(zhǎng)特性  貼壁生長(zhǎng)
特征特性   該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使EC109細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；400ug/ml G418
傳代方法  1:3傳代；2~3天1次。　
傳代情況  C3
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)  培養(yǎng)法（-）　
STR   Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,10；D12S391：19,20；D13S317：11,11；D16S539：12,12；D18S51：12,16；D19S433：13,13；D21S11：30,30；D2S1338：17,20；D3S1358：17,17；D5S818：12,12；D6S1043：13,13；D7S820：8,12；D8S1179：13,14；；FGA：25,25；Penta E：16,16；TH01：9,9；TPOX：8,8；vWA：16,17；
同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞；EC109-Cas9-572圖片細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
F10 Others Human 人 Coagulation Factor X / FX / F10 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

CL-0152MDA-MB-453(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人滑膜細(xì)胞裂解物HSL

NCI-H838[H838]細(xì)胞，人肺癌細(xì)胞 人肺腺癌細(xì)胞,A2細(xì)胞 腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

兔角膜后基質(zhì)層成纖維細(xì)胞;RCBBF

HAVCR2 Others Human 人 TIMD3 / TIM3 / HAVCR2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
MSC, 小鼠雪旺細(xì)胞 Mouse

CM-R056大鼠腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人卵巢上皮細(xì)胞(HOSEpiC) ( 5×105 )

倉鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞;145-2C11 小鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

人肺癌細(xì)胞;A-427 [A427]

NEGR1 Others Mouse 小鼠 NEGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0901

人齒齦成纖維細(xì)胞 (HGF)( 5×105 )

CL-0399NCI-H295R(人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PC-3M IE8 大鼠骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

CBRH-7919 大鼠肝癌細(xì)胞

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
0.0每支添加于HB4086中

Combinednitrogen-fixingbacteriamedium

布氏肉湯 Brucella Broth 250 用于彎曲桿菌增菌肉湯和布氏瓊脂制備(SN標(biāo)準(zhǔn))

細(xì)菌保存培養(yǎng)基250g/瓶用于菌種培養(yǎng)與保存，可制備菌種保存斜面(pH7.3)incubationmedia細(xì)菌保存培養(yǎng)基250g/瓶用于菌種培養(yǎng)與保存，可制備菌種保存斜面(pH7.3)

Baird-ParkerAgarBase
馬鈴薯葡萄糖水250g用于椰毒假單胞酵米面亞種和真菌的增菌培養(yǎng)

40%尿素水 5mL/支×10(g) incubation media 40%尿素水 5mL/支×10(g)

7% NaC1胰胨水發(fā)酵管 7% NaC1胰胨水發(fā)酵管 20支 BR

LM-250用于膜濾法單增李氏菌選擇性分離(NEOGEN標(biāo)準(zhǔn))incubationmediaLM-250用于膜濾法單增李氏菌選擇性分離(NEOGEN標(biāo)準(zhǔn))

馬尿酸鈉培養(yǎng)基 250g 用于彎曲桿菌的馬尿酸鈉水解試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞；EC109-Cas9-572圖片厭氧培養(yǎng)液250g用于厭氧菌增菌培養(yǎng)

10%氯胰酪胨大豆肉湯 10% NaCl Tryptic Soy Broth 用于*的MPN測(cè)定，增菌培養(yǎng)(GB2008標(biāo)準(zhǔn))

牛肉浸粉 Beef Extract Powder 250 培養(yǎng)基原材料，提供細(xì)菌生長(zhǎng)所需的生長(zhǎng)因子

強(qiáng)化梭菌瓊脂250g/瓶用于梭菌的分離培養(yǎng)incubationmedia強(qiáng)化梭菌瓊脂250g/瓶用于梭菌的分離培養(yǎng)

甲基紅指示劑盒 5ml*2 用于甲基紅試驗(yàn)
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人食管癌細(xì)胞；EC109-Cas9-572圖片培養(yǎng)溫馨提示：
1）公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代，不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
2）公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對(duì)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新。但限于我們的技術(shù)條件，中心不保證其準(zhǔn)確性。
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