當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>ATCC細胞>>腫瘤細胞>> Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-574培養(yǎng)
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
聯(lián)系方式:陳經(jīng)理查看聯(lián)系方式
更新時間:2017-09-07 11:53:34瀏覽次數(shù):172次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-574培養(yǎng)凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細胞活力狀態(tài)良好的細胞株1420株,其中絕大部分是近年來從美國ATCC和NIH分批引進的細胞種子,少部分來自全國各地細胞研究所,細胞來源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好。凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨期 |
貼壁生長 | 3-5天 |
細胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-574培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使A375細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;1mM丙酮酸鈉+4mML-Glutamine;400ug/ml G418
傳代方法 1:3~1:8傳代;2~3天換液1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:11,12;D12S391:18,21;D13S317:11,11;D16S539:9,9;D18S51:12,17;D19S433:13,14.2;D21S11:29,30;D2S1338:16,24;D3S1358:15,17;D5S818:12,12;D6S1043:11,14;D7S820:9,9;D8S1179:11,14;FGA:23,23;Penta E:10,12;TH01:8,8;TPOX:8,10;vWA:16,17;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-574培養(yǎng)復(fù)蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-574培養(yǎng)操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
SELL Others Cynomolgus 食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0148MADB106(大鼠癌細胞)5×106cells/瓶×2
人前列腺上皮細胞裂解物HPEpiCL
1590細胞,人癌細胞系 小鼠淋巴瘤,EL-4細胞 腦靜脈血管平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細胞) 5×106cells/瓶×2
HMC Pellet 人冠狀動脈平滑肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人心臟成纖維細胞-心室裂解物HCF-av L
MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 Mouse
CM-R072大鼠腎管狀上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
18. 卵巢細胞系統(tǒng)
小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH2 小鼠腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
人急性T淋巴細胞性白血病細胞;I 2.1(CRL-2572)
KIT Others Mouse 小鼠 c-kit / CD117 人細胞裂解液 (陽性對照)
人皮膚成纖維細胞;CCC-HSF-1
人肺成纖維細胞 (HPF)( 5×105 )
CL-0277HCC94(人子宮鱗癌細胞(高分化))5×106cells/瓶×2
人肺粘液上皮樣癌細胞;NCI-H292 大鼠表皮黑色素細胞*培養(yǎng)基 100mL
MFC 小鼠胃癌細胞
TFRC Others Human 人 TFRC / CD71 人細胞裂解液 (陽性對照)
沙門氏志賀氏增菌液250g用于志賀氏菌和沙門氏菌增菌培養(yǎng)
Nitrogen-fixingRhizobiummedium
產(chǎn)毒培養(yǎng)基 Toxin-Producing Medium 250 用于青霉、曲霉的產(chǎn)毒培養(yǎng)
TGC培養(yǎng)基250g/瓶用于無菌檢驗(日本)incubationmediaTGC培養(yǎng)基250g/瓶用于無菌檢驗(日本)
MFCAgar
半固體瓊脂26050250g供細菌動力觀察、菌種保存等用(GB4789.4-20/T4789.8-2008)。
3號抗生素培養(yǎng)基(Assay 肉湯) (CM0287) Oxoid incubation media 3號抗生素培養(yǎng)基(Assay 肉湯) (CM0287) Oxoid
扇形平菇、扁形平菇 殺蚊子 支/瓶
NutrientAgar
肉湯培養(yǎng)基G 250g 用于大腸桿菌、大腸菌群的檢測
Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-574培養(yǎng)氧化酶試劑細菌氧化酶試驗
亮綠瓊脂 250(g) incubation media 亮綠瓊脂 250(g)
三苯四唑*吐溫80營養(yǎng)瓊脂 TTC Lecithin Tween 80 Nutrient Agar 250克 用于化妝品中細菌總數(shù)測定
膽硫乳瓊脂(DHL)250腸道菌選擇性培養(yǎng)基,特別是沙門氏菌的選擇性分離(GB、SN標準)incubationmedia膽硫乳瓊脂(DHL)250腸道菌選擇性培養(yǎng)基,特別是沙門氏菌的選擇性分離(GB、SN標準)
BrilliantGreenAgar
Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-574培養(yǎng)現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細胞株,細胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細閱讀本說明書。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責(zé),儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。