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Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-574培養(yǎng)

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更新時間:2017-09-07 11:53:34瀏覽次數(shù):172次

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Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-574培養(yǎng)來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等品牌),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。

Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-574培養(yǎng)凍保存方法一:冷凍管置于4300分鐘→(-2030分鐘*)→-8016~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。 
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3–80以下,再放入液氮槽期儲存。-20不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80冰箱中,但存活率稍微降低一些。 
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細胞活力狀態(tài)良好的細胞株1420株,其中絕大部分是近年來從美國ATCCNIH分批引進的細胞種子,少部分來自全國各地細胞研究所,細胞來源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好。凍保存方法一:冷凍管置于4300分鐘→(-2030分鐘*)→-8016~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。

產(chǎn)品名稱

生長特性

貨期

Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-574培養(yǎng)

貼壁生長

35

細胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-574培養(yǎng)
形態(tài)特性   上皮樣
生長特性   貼壁生長
特征特性    該細胞是采用慢病毒感染的方式使A375細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;1mM丙酮酸鈉+4mML-Glutamine400ug/ml G418
傳代方法   1:3~1:8傳代;2~3天換液1次。
傳代情況  C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 
支原體檢測  培養(yǎng)法(- 
STR   Amelogeninx,xCSF1PO11,12;D12S39118,21;D13S31711,11D16S5399,9;D18S5112,17;D19S43313,14.2;D21S1129,30;D2S133816,24;D3S135815,17D5S81812,12;D6S104311,14;D7S8209,9D8S117911,14;FGA23,23Penta E10,12;TH018,8;TPOX8,10vWA16,17;
同工酶

染色體

使用權(quán)限 A 
Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-574培養(yǎng)復(fù)蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37水浴鍋中復(fù)溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-574培養(yǎng)操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37溫箱培養(yǎng)。
SELL Others Cynomolgus 食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0148MADB106(大鼠癌細胞)5×106cells/瓶×2

人前列腺上皮細胞裂解物HPEpiCL

1590細胞,人癌細胞系 小鼠淋巴瘤,EL-4細胞 腦靜脈血管平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細胞) 5×106cells/瓶×2

HMC Pellet 人冠狀動脈平滑肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人心臟成纖維細胞-心室裂解物HCF-av L
MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 Mouse

CM-R072大鼠腎管狀上皮細胞*培養(yǎng)基100mL

18. 卵巢細胞系統(tǒng)

小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH2 小鼠腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

人急性T淋巴細胞性白血病細胞;I 2.1(CRL-2572)

KIT Others Mouse 小鼠 c-kit / CD117 人細胞裂解液 (陽性對照)
人皮膚成纖維細胞;CCC-HSF-1

人肺成纖維細胞 (HPF)( 5×105 )

CL-0277HCC94(人子宮鱗癌細胞(高分化))5×106cells/瓶×2

人肺粘液上皮樣癌細胞;NCI-H292 大鼠表皮黑色素細胞*培養(yǎng)基 100mL

MFC 小鼠胃癌細胞

TFRC Others Human TFRC / CD71 人細胞裂解液 (陽性對照)
沙門氏志賀氏增菌液250g用于志賀氏菌和沙門氏菌增菌培養(yǎng)

Nitrogen-fixingRhizobiummedium

產(chǎn)毒培養(yǎng)基 Toxin-Producing Medium 250 用于青霉、曲霉的產(chǎn)毒培養(yǎng)

TGC培養(yǎng)基250g/瓶用于無菌檢驗(日本)incubationmediaTGC培養(yǎng)基250g/瓶用于無菌檢驗(日本)

MFCAgar
半固體瓊脂26050250g供細菌動力觀察、菌種保存等用(GB4789.4-20/T4789.8-2008)

3號抗生素培養(yǎng)基(Assay 肉湯) (CM0287) Oxoid incubation media 3號抗生素培養(yǎng)基(Assay 肉湯) (CM0287) Oxoid

扇形平菇、扁形平菇 殺蚊子 /

NutrientAgar

肉湯培養(yǎng)基G 250g 用于大腸桿菌、大腸菌群的檢測
Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-574培養(yǎng)氧化酶試劑細菌氧化酶試驗

亮綠瓊脂 250(g) incubation media 亮綠瓊脂 250(g)

三苯四唑*吐溫80營養(yǎng)瓊脂 TTC Lecithin Tween 80 Nutrient Agar 250 用于化妝品中細菌總數(shù)測定

膽硫乳瓊脂(DHL)250腸道菌選擇性培養(yǎng)基,特別是沙門氏菌的選擇性分離(GB、SN標準)incubationmedia膽硫乳瓊脂(DHL)250腸道菌選擇性培養(yǎng)基,特別是沙門氏菌的選擇性分離(GB、SN標準)

BrilliantGreenAgar

Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-574培養(yǎng)現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細胞株,細胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細閱讀本說明書。

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