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更新時間:2017-09-07 11:52:01瀏覽次數(shù):94次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞;PC-3-Cas9-576圖片
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長,在軟瓊脂中成簇生長,并可懸浮生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使PC-3細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 F12K 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 1:3~1:6傳代;每周2~3次換液。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:11,11;D12S391:21,21;D13S317:11,11;D16S539:11,11;D18S51:14,15;D19S433:14,14;D21S11:29,31.2;D2S1338:18,20;D3S1358:16,16;D5S818:13,13;D6S1043:18,18;D7S820:8,11;D8S1179:13,13;FGA:24,24;Penta E:10,17;TH01:6,7;TPOX:8,9;vWA:17,17;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞;PC-3-Cas9-576圖片質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞;PC-3-Cas9-576圖片細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞;PC-3-Cas9-576圖片培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實現(xiàn)為科學研究提供實驗細胞技術(shù)服務。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關(guān)信息進行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風險和責任,采取適當?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。
GPT2 Others Rat 大鼠 GPT2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0144LoVo(人大腸癌細胞)5×106cells/瓶×2
人腎系膜細胞裂解物HRMCL
SK-OV-3[SKOV-3]細胞,人卵巢癌細胞 人支氣管上皮細胞,HBE細胞 腦膜細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
兔角膜前基質(zhì)層成纖維細胞;RCFBF
TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠成纖維細胞(EGFP標記) Mouse
CM-R088大鼠破骨細胞*培養(yǎng)基100mL
人脂肪細胞-內(nèi)臟(HPA-v)(1×106 )
小鼠肺腺癌細胞系;LA795 小鼠食管平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
小鼠T淋巴細胞瘤細胞;Cyc-Tag(S49)
LY9 Others Mouse 小鼠 Ly9 / CD229 / SLAMF3 人細胞裂解液 (陽性對照)
人正常前列腺上皮細胞;RWPE-1
人肺動脈內(nèi)皮細胞(HPAEC) ( 5×105 )
CL-0333E.G7-OVA(小鼠T淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2
人導管癌細胞;HCC38 大鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞*培養(yǎng)基 100mL
H22 小鼠肝癌細胞
DSC2 Others Human 人 DSC2 / Desmocollin-2 人細胞裂解液 (陽性對照)
液2ml*20每支添加于HB4086中
Phosphate-solubilizingbacteriamedium
腸道菌增菌肉湯(EE肉湯) Enterobacteria Enrichment Broth 250 用于腸道菌的增菌培養(yǎng)(GB、FDA標準)
胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基250g/瓶用于細菌培養(yǎng)及抑菌劑效力檢查incubationmedia胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基250g/瓶用于細菌培養(yǎng)及抑菌劑效力檢查
FuchsinBasicSodiumSulfideAgar
改良克氏雙糖培養(yǎng)基2990g用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的鑒定
3231-prf SAEpiCM-prf 小氣道上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 3231-prf SAEpiCM-prf 小氣道上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml
玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基 300ml/袋*10 用于霉菌、酵母菌計數(shù)
腸球菌瓊脂(膽汁七葉苷瓊脂)250g用于食品和水中腸球菌的計數(shù)。
EugonicAgar
Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞;PC-3-Cas9-576圖片氧化*胺培養(yǎng)基250g用于分解
50010 瓊脂粉 BR 250 g 培養(yǎng)基凝固劑 incubation media 50010 瓊脂粉 BR 250 g 培養(yǎng)基凝固劑
酮叢毛單胞菌 反硝化細菌 支/瓶
LBBroth(Miller)
YPDAMedium
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