Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞；PC-3-Cas9-578培養(yǎng)質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，進口來源，保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中，1個月內出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
細胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞；PC-3-Cas9-578培養(yǎng)
形態(tài)特性   上皮樣
生長特性  貼壁生長,在軟瓊脂中成簇生長，并可懸浮生長
特征特性   該細胞是采用慢病毒感染的方式使PC-3細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo，經400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件   F12K 10%FBS；400ug/ml G418
傳代方法  1:3~1:6傳代；每周2~3次換液。　
傳代情況  C3
凍存條件   基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養(yǎng)法（-）　
STR   Amelogenin：x,x；CSF1PO：11,11；D12S391：21,21；D13S317：11,11；D16S539：11,11；D18S51：14,15；D19S433：14,14；D21S11：29,31.2；D2S1338：18,20；D3S1358：16,16；D5S818：13,13；D6S1043：18,18；D7S820：8,11；D8S1179：13,13；FGA：24,24；Penta E：10,17；TH01：6,7；TPOX：8,9；vWA：17,17；
同工酶

染色體

使用權限 A類
Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞；PC-3-Cas9-578培養(yǎng)細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
IFNAR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0140LLC(小鼠肺癌細胞)5×106cells/瓶×2

人腎小球內皮細胞裂解物HRGECL

A2780細胞，人卵巢癌細胞 鮭魚胚胎細胞,CHSE細胞 腦微血管內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

BNL 1ME A.7R.1(小鼠肝上皮細胞) 5×106cells/瓶×2

HAoSMC Pellet 人主動脈平滑肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人無色素睫狀上皮細胞裂解物HNPCEpiCL
人星形膠質細胞 Human

CM-R104大鼠腦膜細胞*培養(yǎng)基100mL

7130 人絨毛間葉成纖維細胞(HVT)( 5×105 )

小鼠胚胎成纖維細胞;BALB/C 3T3 小鼠骨髓基質細胞*培養(yǎng)基 100mL

野生型人c-kit受體細胞株;A7d

CD9 Others Human 人 CD9 / Tspan-29 人細胞裂解液 (陽性對照)
白介素-2轉染耐VP16絨癌細胞;JEG-3/VP16-IL-2

人肺間充質干細胞(肺)(HPMSC)(5×105)

CM-H136人牙周膜成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL

小鼠淋巴瘤細胞;P388D1(IL-1) 小鼠胃粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

細胞名稱 種屬

JAM2 Others Mouse 小鼠 JAM-2 / JAM-B 人細胞裂解液 (陽性對照)
BufferedPeptoneWater

SilicateBacteriaMedium

腸球菌瓊脂(膽鹽-七葉苷-疊氮瓊脂) Enterococcus Agar(Bile Esculin Azide Agar) 250 用于腸球菌和腸道致病菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法)

溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基250g/瓶用于滅菌效果檢驗incubationmedia溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基250g/瓶用于滅菌效果檢驗

VioletRedBileAgar
血平板(成品培養(yǎng)基)2407020個/盒用于營養(yǎng)要求較高的細菌的培養(yǎng)及溶血試驗

3201-prf AEpiCM-prf 肺泡上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 3201-prf AEpiCM-prf 肺泡上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml

改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基 300ml/袋*10 用于藥品及生物制品霉菌無菌檢驗

MEI培養(yǎng)基l用于一步濾膜法顯色檢測或計數(shù)水中的腸球菌

HB7035
Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞；PC-3-Cas9-578培養(yǎng)野生酵母培養(yǎng)基250g用于野生酵母計數(shù)培養(yǎng)

亞利桑那瓊脂(SA) 100(g) incubation media 亞利桑那瓊脂(SA) 100(g)

IMDM培養(yǎng)基 IMDM 10升 BR

緩沖李氏菌增菌肉湯基礎250用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(MercK標準)incubationmedia緩沖李氏菌增菌肉湯基礎250用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(MercK標準)

SkirrowAgarBase,Modified
Cas9穩(wěn)定表達的人前列腺癌細胞；PC-3-Cas9-578培養(yǎng)培養(yǎng)溫馨提示：
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2）公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關信息進行及時更新。但限于我們的技術條件，中心不保證其準確性。
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