當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>ATCC細(xì)胞>>腫瘤細(xì)胞>> Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B-Cas9-586培養(yǎng)
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更新時(shí)間:2017-09-07 11:43:47瀏覽次數(shù):152次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)GFP標(biāo)記的小鼠子細(xì)胞;U14-GFP圖片
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B-Cas9-586培養(yǎng)凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細(xì)胞活力狀態(tài)良好的細(xì)胞株1420株,其中絕大部分是近年來從美國ATCC和NIH分批引進(jìn)的細(xì)胞種子,少部分來自全國各地細(xì)胞研究所,細(xì)胞來源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好。凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲存。
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨期 |
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B-Cas9-586培養(yǎng) | 貼壁生長 | 3-5天 |
細(xì)胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B-Cas9-586培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使HEC-1B細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 消化3-5分鐘;1:2傳代;3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 C3
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:10,12;D12S391:18,19;D13S317:11,11;D16S539:11,12;D18S51:16,20;D19S433:13,13;D21S11:30,31;D2S1338:18,19;D3S1358:15,15;D5S818:11,13;D6S1043:12,18;D7S820:9,11;D8S1179:13,14;FGA:21,21;Penta E:11,11;TH01:6,7;TPOX:8,11;vWA:18,18;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B-Cas9-586培養(yǎng)復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B-Cas9-586培養(yǎng)操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
TNFSF8 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0124IMR-32(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人腸平滑肌細(xì)胞裂解物HISMCL
COC1/CDDP細(xì)胞,人卵巢癌*耐藥株 大黃魚腎細(xì)胞,PCK細(xì)胞 臍靜脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
HTSMC Pellet 人類氣管平滑肌細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人臍靜脈平滑肌細(xì)胞裂解物HUVSMCL
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞 Mouse
CM-M043小鼠小腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人晶狀體上皮細(xì)胞 (HLEpiC)( 5×105 )
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T6-Swiss albino 小鼠頜下腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1
PTX3 Others Human 人 PTX3 / TNFAIP5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1
人骨骼肌成肌細(xì)胞(HSkMM)(5×105)
CL-0227T-24(人膀胱癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人膀胱癌細(xì)胞;5637(HTB-9) 大鼠神經(jīng)元細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
N-H 小鼠骨髓瘤淋巴細(xì)胞
LYPD3 Others Human 人 LYPD3 / MIG-C4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
四硫磺酸鹽煌綠增菌液基礎(chǔ)(TTB)250g用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng),需加入煌綠和液
BYP瓊脂培養(yǎng)基 250g 用于巴氏桿菌分離培養(yǎng)
動(dòng)力-吲哚-尿素培養(yǎng)基基礎(chǔ)(MIU) Motility Indol Urea Medium Base 250 用于細(xì)菌的復(fù)合生化試驗(yàn)
哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶廣泛用于細(xì)菌,尤其是彎曲桿菌、鏈球菌等苛養(yǎng)菌的培養(yǎng),每培養(yǎng)基中添加5ml~5070ubationmedia哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶廣泛用于細(xì)菌,尤其是彎曲桿菌、鏈球菌等苛養(yǎng)菌的培養(yǎng),每培養(yǎng)基中添加5ml~50701
BismuthSulfiteAgar
亞利桑那菌瓊脂(SA)2300g用于亞利桑那菌選擇性分離培養(yǎng)。(SN02)
2號麥康凱瓊脂(CM0109) Oxoid incubation media 2號麥康凱瓊脂(CM0109) Oxoid
普雷恩毛霉 強(qiáng)化酵淀粉糖化液,酒精及白酒酵母 支/瓶
NutrientBroth
連四鹽培養(yǎng)基 250g 用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B-Cas9-586培養(yǎng)液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基250g用于藥品,生物制品無菌試驗(yàn),培養(yǎng)菌、厭氣菌(GB標(biāo)準(zhǔn))
馬鈴薯-葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA) 250(g) incubation media 馬鈴薯-葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA) 250(g)
腸道菌增菌液 Enterobacteria Enrichment Broth 250克 腸道菌的增菌培養(yǎng)
氯多粘菌素B肉湯基礎(chǔ)(SCPB)250用于副溶血性弧菌選擇性增菌培養(yǎng),用前應(yīng)無菌加入多粘菌素B(SN標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia氯多粘菌素B肉湯基礎(chǔ)(SCPB)250用于副溶血性弧菌選擇性增菌培養(yǎng),用前應(yīng)無菌加入多粘菌素B(SN標(biāo)準(zhǔn))
緩沖蛋白胨水(BPW) 250g 用于沙門氏菌前增菌培養(yǎng),亦可用于李氏菌前增菌培養(yǎng)(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B-Cas9-586培養(yǎng)現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。
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