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更新時間:2017-09-07 11:42:20瀏覽次數(shù):92次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達的人子宮內(nèi)膜腺癌細胞;HEC-1-B-Cas9-588圖片
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使HEC-1B細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 消化3-5分鐘;1:2傳代;3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 C3
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:10,12;D12S391:18,19;D13S317:11,11;D16S539:11,12;D18S51:16,20;D19S433:13,13;D21S11:30,31;D2S1338:18,19;D3S1358:15,15;D5S818:11,13;D6S1043:12,18;D7S820:9,11;D8S1179:13,14;FGA:21,21;Penta E:11,11;TH01:6,7;TPOX:8,11;vWA:18,18;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達的人子宮內(nèi)膜腺癌細胞;HEC-1-B-Cas9-588圖片質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
Cas9穩(wěn)定表達的人子宮內(nèi)膜腺癌細胞;HEC-1-B-Cas9-588圖片細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
Cas9穩(wěn)定表達的人子宮內(nèi)膜腺癌細胞;HEC-1-B-Cas9-588圖片培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實現(xiàn)為科學(xué)研究提供實驗細胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關(guān)信息進行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準(zhǔn)確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風(fēng)險和責(zé)任,采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。
MAPKAPK3 Others Human 人 MAPKAPK3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0120HuH-7(人肝癌細胞)5×106cells/瓶×2
人牙周膜成纖維細胞裂解物HPLFL
SW 1088[SW-1088;SW1088]細胞,人腦星型膠質(zhì)瘤細胞 人腎癌細胞,OS-RC-2細胞 氣管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
兔晶體上皮細胞永生系;N/N1003A(RLE)
MSR1 Others Human 人 MSR1 / SCARA1 / CD204 人細胞裂解液 (陽性對照)
人間充質(zhì)干細胞-臍帶 Human
CM-M059小鼠膀胱平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
人視網(wǎng)膜內(nèi)皮細胞 (HREC)( 5×105 )
小鼠肝癌細胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6] 小鼠胰腺星狀細胞*培養(yǎng)基 100mL
雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3
TPST1 Others Human 人 TPST1 人細胞裂解液 (陽性對照)
非洲綠猴腎細胞系/HCV-C;Vero-HCV-C
人骨骼肌星形細胞(HSkMSC)(5×105)
CL-0235TSCCa(人舌鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2
人急性T淋巴細胞性白血病細胞;I 2.1(CRL-2572) 大鼠腦膜細胞*培養(yǎng)基 100mL
NG108-15 大鼠小鼠雜合神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞
COL2A1 Others Human 人 COL2A1 (aa 1242-1487) 人細胞裂解液 (陽性對照)
LeadAcetateMedium
BacillusMegatheriumMedium
副溶血性弧菌瓊脂 250 用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)
緩沖蛋白胨水(BPW)250g/瓶用于沙門氏菌、阪崎腸桿菌前增菌,也可用于其它細菌的培養(yǎng)incubationmedia緩沖蛋白胨水(BPW)250g/瓶用于沙門氏菌、阪崎腸桿菌前增菌,也可用于其它細菌的培養(yǎng)
XyloseLysineDesoxycholateMedium
BM固體培養(yǎng)基250g用于醋酸鈣不動桿菌增菌培養(yǎng)
28981 技術(shù)瓊脂粉 BR 500g 培養(yǎng)基凝固劑,具有良好的透明度,凝膠強度,較低的凝固溫度 incubation media 28981 技術(shù)瓊脂粉 BR 500g 培養(yǎng)基凝固劑,具有良好的透明度,凝膠強度,較低的凝固溫度
構(gòu)巢曲霉 模式菌株 支/瓶
LB瓊脂250用于基因工程菌大腸桿菌培養(yǎng)
*麥芽提取物瓊脂培養(yǎng)基 250g 用于真菌的分離培養(yǎng)
Cas9穩(wěn)定表達的人子宮內(nèi)膜腺癌細胞;HEC-1-B-Cas9-588圖片液體培養(yǎng)基250g用于甲烷菌計數(shù)培養(yǎng)
Sabouraud Dextrose Agar incubation media Sabouraud Dextrose Agar
大孢綠僵菌=金龜子綠僵菌大孢變種 氧化已醇產(chǎn)醋酸 支/瓶
TryptoseSoyaAgar
MUG培養(yǎng)基 100g 用于大腸桿菌測定
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