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更新時間:2017-09-07 10:42:57瀏覽次數(shù):172次
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2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關信息進行及時更新。但限于我們的技術條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
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細胞名稱 人結直腸癌細胞;DiFi培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10% FBS
傳代方法
傳代情況
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,11;D13S317:8,11;D16S539:12;D18S51:13;D21S11:32;D3S1358:17,18;D5S818:11,12;D7S820:10,12;D8S1179:12;FGA:23,27;PentaD:12;PentaE:12,18;TH01:7,9.3;TPOX:8,9;vWA:17,18
同工酶
染色體
使用權限 B類
人結直腸癌細胞;DiFi培養(yǎng)細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
CLEC14A Others Rat 大鼠 CLEC14A / EGFR-5 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0092HBZY-1(大鼠腎小球系膜細胞)5×106cells/瓶×2
人海馬趾神經(jīng)細胞裂解物HN-h L
Caov-3細胞,人卵巢癌細胞 大鼠胰島素細胞,INS-1細胞 神經(jīng)元細胞Many types of cells包裝:5 ×105次方(1ml)
Chang liver (CCL13) (人張氏肝細胞) 5×106cells/瓶×2
SkMC Pellet 人骨骼肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人生發(fā)基質(zhì)細胞cDNAHHGMC cDNA
HCT/Taxol 人結腸癌*耐藥
CL-0051CaES-17(人食管癌細胞)5×106cells/瓶×2
人肝細胞 (HH) (1×106 )
小鼠胚胎成纖維細胞(來自NIH3T3);PA12 小鼠肺血管平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21
ACE2 Others Mouse 小鼠 ACE2 / ACEH 人細胞裂解液 (陽性對照)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY1036
人淋巴成纖維細胞 (HLF)( 5×105 )
CL-0423RIN-m5f(大鼠胰島β細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
人胰腺腺泡上皮癌;HPAC 大鼠冠狀動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
B16 小鼠黑色素瘤細胞
SEMA4D Others Human 人 SEMA4D / CD100 人細胞裂解液 (陽性對照)
改良BPLS瓊脂250g用于各種標本中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)(ISO標準)
肉膏酵母葡萄糖瓊脂 250g 用于厭氧菌培養(yǎng)
高鹽察氏瓊脂 Salt Czapek Dox Agar 250 用于霉菌和酵母菌的計數(shù)(GB標準)
Amies*250g/瓶用于致病菌標本的采集、運輸和保存incubationmediaAmies*250g/瓶用于致病菌標本的采集、運輸和保存
NutrientAgar
Bolton肉湯基礎27380250g用于空腸彎曲菌的選擇性增菌(GB),每基礎培養(yǎng)基需添加劑(SR0340)
2331 FM-2 成纖維細胞培養(yǎng)基-2(用于心肌成纖維細胞) 500 ml incubation media 2331 FM-2 成纖維細胞培養(yǎng)基-2(用于心肌成纖維細胞) 500 ml
紫紅曲霉 支/瓶
LIMMedium
StrainStoreMedium
人結直腸癌細胞;DiFi培養(yǎng)胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基28072250g用于普通的或營養(yǎng)要求較高的細菌的培養(yǎng),還用于醫(yī)藥工業(yè)潔凈室無菌程度的監(jiān)測及消毒劑消毒效果的...
Agar A 瓊脂A 100g incubation media Agar A 瓊脂A 100g
香菇 支/瓶
緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR-VP試驗用培養(yǎng)基)250g用于大腸桿菌的甲基紅實驗和VP實驗
碘伏(液體) 500g 炭疽桿菌檢測用配套試劑
人結直腸癌細胞;DiFi培養(yǎng)質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
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