細(xì)胞名稱  人食管癌細(xì)胞；NEC培養(yǎng)
形態(tài)特性   多角
生長(zhǎng)特性  貼壁生長(zhǎng)
特征特性   郭永軍等建系；甲基芐（NMB2A）誘發(fā)人胎兒食管鱗癌第14代裸小鼠移植瘤組織小塊，培養(yǎng)3年，已傳40余代，上皮樣多邊細(xì)胞，貼壁生長(zhǎng)，裸小鼠移植成功。
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法  1:3~1:6傳代；2~3天1次。　
傳代情況  C3
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)  培養(yǎng)法（-）　
STR   
同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
人食管癌細(xì)胞；NEC培養(yǎng)質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，進(jìn)口來(lái)源，保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
人食管癌細(xì)胞；NEC培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
人食管癌細(xì)胞；NEC培養(yǎng)培養(yǎng)溫馨提示：
1）公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代，不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
2）公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對(duì)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新。但限于我們的技術(shù)條件，中心不保證其準(zhǔn)確性。
3）從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí)，僅供參考。
4）使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時(shí)候要遵守國(guó)內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī)，充分考慮可能存在的風(fēng)險(xiǎn)和責(zé)任，采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對(duì)健康或環(huán)境的危害。

ATL1 Others Human 人 ATL1 / SPG3A / Atlastin-1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

BRL 3A, 大鼠肝正常細(xì)胞

人胚肺成纖維細(xì)胞;WI-38 [WI38]

CHO細(xì)胞，中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞,NCI-H460細(xì)胞 CL-0412PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆); EPO-CHO-T

HRG Others Human 人 HPRG / HRG 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
b16 小鼠黑色素瘤細(xì)胞

CL-0455TE671 subline No.2(人橫紋肌肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人外殼細(xì)胞(HHorSC)( 5×105 )

人細(xì)胞;C-33A 大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

人腦瘤細(xì)胞;SF767

TIE1 Others Human 人 Tie1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
黑化大家鼠肺成纖維細(xì)胞;NRm

人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞 (HCMEC)( 5×105 )

CL-0027AsPC-1(人胰腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠紅白血病細(xì)胞;MEL 小鼠氣管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 Rattus

SDC1 Others Mouse 小鼠 SDC1 / Syndecan-1 / SYND1 / CD138 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
賴酸脫羧酶培養(yǎng)基5g生化培養(yǎng)基，賴酸脫羧酶試驗(yàn)(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))

Drosophilamedium

乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸瓊脂 LMG Agar 250 用于濾膜MUG法檢測(cè)食品中大腸菌群數(shù)(SN/T1059.2)

LS培養(yǎng)基250g/瓶用于植物組織培養(yǎng)incubationmediaLS培養(yǎng)基250g/瓶用于植物組織培養(yǎng)

含225mlFB1增菌液均質(zhì)袋 10個(gè)/包 用于李氏菌前增菌培養(yǎng)(SN 標(biāo)準(zhǔn))
脆弱擬桿菌活化培養(yǎng)基肉湯250g用于脆弱擬桿菌活化培養(yǎng)

110mg/l丙酮酸鈉，不含*" 12800-017 10*1L 110mg/l丙酮酸鈉，不含*" 12800-017 10*1L

*金黃亞種 面包酵母 支/瓶

*卵黃多粘菌素瓊脂平板(9cm)用于蠟樣芽孢桿菌的固體平板計(jì)數(shù)

微生物限度檢查培養(yǎng)基
人食管癌細(xì)胞；NEC培養(yǎng)有機(jī)磷細(xì)菌培養(yǎng)基250g用于測(cè)定磷細(xì)菌肥料中磷細(xì)菌分解有機(jī)磷的的效能

Lysine Iron Agar incubation media Lysine Iron Agar

白色葡萄球菌 支/瓶

含225ml磷酸鹽緩沖液均質(zhì)袋用于菌落總數(shù)，大腸菌群，金葡菌，大腸桿菌樣品制備

乳糖膽鹽培養(yǎng)基 250g 用于化妝品中糞大腸菌群的測(cè)定(GB標(biāo)準(zhǔn))