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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>ATCC細(xì)胞>>腫瘤細(xì)胞>> 熒光素酶轉(zhuǎn)染人成骨肉瘤細(xì)胞;U2OS-Luc teT-on培養(yǎng)
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所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2017-09-07 09:56:37瀏覽次數(shù):110次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)GFP標(biāo)記的小鼠子細(xì)胞;U14-GFP圖片
熒光素酶轉(zhuǎn)染人成骨肉瘤細(xì)胞;U2OS-Luc teT-on培養(yǎng)凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細(xì)胞活力狀態(tài)良好的細(xì)胞株1420株,其中絕大部分是近年來(lái)從美國(guó)ATCC和NIH分批引進(jìn)的細(xì)胞種子,少部分來(lái)自全國(guó)各地細(xì)胞研究所,細(xì)胞來(lái)源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好。凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨期 |
貼壁生長(zhǎng) | 3-5天 |
細(xì)胞名稱 熒光素酶轉(zhuǎn)染人成骨肉瘤細(xì)胞;U2OS-Luc teT-on培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣;多角形
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 表達(dá)熒光素酶,帶四環(huán)素開(kāi)關(guān)。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%Tet system 提供的胎牛血清;200 μg/ml G418
傳代方法 1:2~1:4傳代,每周2次換液。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:12,13;D13S317:13;D16S539:11,12;D18S51:12,14;D19S433:15;D21S11:31;D2S1338:20,24;D3S1358:16,OL;D5S818:8,11;D7S820:11,12;D8S1179:12,14;FGA:20;TH01:6,9.3;TPOX:11,12;vWA:14,18;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
熒光素酶轉(zhuǎn)染人成骨肉瘤細(xì)胞;U2OS-Luc teT-on培養(yǎng)復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
熒光素酶轉(zhuǎn)染人成骨肉瘤細(xì)胞;U2OS-Luc teT-on培養(yǎng)操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
NCR1 Others Rat 大鼠 NCR1 / NK-p46 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1
原代神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特制無(wú)血清添加劑Many types of cells包裝:1ml
ECV-304細(xì)胞,人臍靜脈內(nèi)皮(具有T24細(xì)胞特性) * 人牙齦成纖維細(xì)胞總RNAHGF tRNA
RAG(小鼠腎腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
WB-F344(大鼠肝上皮樣干細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0271D283 Med(人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL3
PC-12(高分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化)
人星形膠質(zhì)細(xì)胞
人成纖維母細(xì)胞-(HDF-a)( 5×105 )
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LoVo 大鼠輸尿管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B
SLAMF6 Others Human 人 Ly108 / SLAMF6 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
鯉魚(yú)尾鰭細(xì)胞;YZ16
人支氣管平滑肌細(xì)胞 (HBSMC)( 5×105 )
CL-0268COLO 201(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人低侵襲性脈絡(luò)膜黑色素素瘤細(xì)胞;OCM-1A 大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
MLA144 MLA144長(zhǎng)臂猿淋巴瘤細(xì)胞
IFNL3 Others Human 人 IL28B / IL28C / Interleukin-28B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
氯化孔雀綠肉湯(MM,RV250g用于沙門(mén)氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
CysteineDiluent
沙門(mén)氏菌顯色培養(yǎng)基 Salmonella Chromogenic Medium 1000ml 用于沙門(mén)氏菌的顯色培養(yǎng)
NS培養(yǎng)基250g/瓶用于植物組織培養(yǎng)incubationmediaNS培養(yǎng)基250g/瓶用于植物組織培養(yǎng)
萘啶酮酸 5.0mg/支*5 每支添加于225ml HBJ005中制成LB1肉湯
GAMAgar,Modified
10010-031 1000ml incubation media 10010-031 1000ml
假結(jié)核耶爾森氏菌 食用和藥用 支/瓶
玫瑰紅鈉瓊脂平板(9cm)用于霉菌、酵母菌計(jì)數(shù)
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB) 1kg 用于藥品生產(chǎn)線無(wú)菌灌裝試驗(yàn)
熒光素酶轉(zhuǎn)染人成骨肉瘤細(xì)胞;U2OS-Luc teT-on培養(yǎng)遠(yuǎn)藤瓊脂(品紅亞鈉)培養(yǎng)基250g用于濾膜法大腸菌群檢測(cè)(GB標(biāo)準(zhǔn))
抗生素檢定培養(yǎng)基4號(hào) Antibiotic Agar NO.4 用于兩性霉素B等的效價(jià)測(cè)定
Rustigian氏尿素肉湯 Rustigian Urea Broth 100克 細(xì)菌尿素酶試驗(yàn)
葡萄球菌選擇性瓊脂250用于凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)incubationmedia葡萄球菌選擇性瓊脂250用于凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)
亞西酸鹽增菌液(SF) 250g 用于增殖標(biāo)本中的沙門(mén)氏菌
熒光素酶轉(zhuǎn)染人成骨肉瘤細(xì)胞;U2OS-Luc teT-on培養(yǎng)現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門(mén)。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。
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