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更新時間:2017-09-06 13:56:09瀏覽次數(shù):115次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)GFP標(biāo)記的小鼠子細(xì)胞;U14-GFP圖片
細(xì)胞名稱 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H1975培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞是1988年7月從一名女性(無抽煙史)非小細(xì)胞肺腺癌組織中分離得到的。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3~1:6傳代;每周換液2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:12;D13S317:10,13;D16S539:9,12;D18S51:13;D19S433:15,15.2;D21S11:28;D2S1338:17;D3S1358:14,15;D5S818:11,12;D7S820:8;D8S1179:13;FGA:21,24;TH01:7;TPOX:8,11;vWA:18;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H1975培養(yǎng)質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進(jìn)口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H1975培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H1975培養(yǎng)培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗細(xì)胞及其子代,不能用于人體實(shí)驗和臨床診斷、治療。
2)公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對實(shí)驗細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準(zhǔn)確性。
3)從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí),僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風(fēng)險和責(zé)任,采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。
RP2 Others Human 人 XRP2 / RP2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0257BC-009(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人前列腺成纖維細(xì)胞cDNAHPrF cDNA
C6細(xì)胞,腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 人肺巨細(xì)胞癌細(xì)胞,HLAmP細(xì)胞 肺大動脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)
TREM1 Others Human 人 TREM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
GC-1, 鼠精原細(xì)胞 Mouse
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO 1beta9,12.5 Clone 36
小鼠雪旺細(xì)胞(MSC)(5×105)
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1) 小鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人支氣管平滑肌細(xì)胞總RNAHBSMC tRNA
PGC Others Human 人 PGC / Gastricsin / Pepsinogen-C 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0257BC-009(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
RP2 Others Human 人 XRP2 / RP2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人前列腺成纖維細(xì)胞cDNAHPrF cDNA
C6細(xì)胞,腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 人肺巨細(xì)胞癌細(xì)胞,HLAmP細(xì)胞 肺大動脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)
TREM1 Others Human 人 TREM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
Anti-Phospho-p63 (Ser160/Ser162) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化P63抑制基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG/Biotin *化兔抗小鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
細(xì)胞表面趨化因子受體1抗體 Anti-CXC-R1 0.2ml
Goat Anti-Mouse IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.1ml
FLASH 英文名稱: 半胱酸蛋白酶8相關(guān)蛋白2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Vimentin (Ser56) 磷酸化波形蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgG/Biotin *化兔抗小鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
MMP-13 (Matrix metalloproteinase 13) 基質(zhì)金屬蛋白酶13抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Angiopoietin 2 血管生成素2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Beta-Catenin(Ser45) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
單組分TMB底物液 12ml/100ml 進(jìn)口分裝
VSIG4 英文名稱: T淋巴細(xì)胞負(fù)調(diào)節(jié)蛋白抗體 0.1ml
DLGAP2 英文名稱: PSD95結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
Anti-Angiopoietin 2 血管生成素2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H1975培養(yǎng)Synaptojanin 2 英文名稱: 磷酸肌醇磷酸酶蛋白INPP5H抗體 0.2ml
Estrogen Receptor alpha 英文名稱: 雌激素受體α抗體 0.1ml
組織蛋白酶D抗體 Anti-cath-D/CD/Cathepsin D 0.1ml
Anti-UCP-1/FITC 熒光素標(biāo)記線粒體脫偶連蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-HMGCR(Ser872) 磷酸化三羥基*基輔酶A還原酶抗體 規(guī)格 0.1ml
CCR-4(C-C chemokine receptor 4) 細(xì)胞表面趨化因子受體4抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
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