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所 在 地上海市
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更新時間:2017-09-06 13:51:28瀏覽次數(shù):155次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞;NCI-H295R培養(yǎng)凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細胞活力狀態(tài)良好的細胞株1420株,其中絕大部分是近年來從美國ATCC和NIH分批引進的細胞種子,少部分來自全國各地細胞研究所,細胞來源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好。凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨期 |
貼壁生長 | 3-5天 |
細胞名稱 人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞;NCI-H295R培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系源于多能腎上腺皮質(zhì)癌細胞系NCI-H295,后者由Gazdar AF等建立,從腎上腺皮質(zhì)的腫瘤中分離而來。NCI-H295細胞經(jīng)改變培養(yǎng)條件獲得了NCI-295R細胞,群體倍增時間從原來的5天減為2天。NCI-295細胞懸浮生長,而NCI-H295R呈單層貼壁生長。NCI-H295R細胞保留了產(chǎn)生雄激素的能力,對血管緊張素Ⅱ和鉀離子有反應。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) Nu-Serum I, 2.5%;15 mM HEPES+0.00625 mg/ml insulin+0.00625 mg/ml transferrin+6.25 ng/ml selenium+1.25 mg/ml bovine serum albumin+0.00535 mg/ml linoleic acid
傳代方法 1:3~1:4傳代;每周換液2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,12;D13S317:13;D16S539:11;D18S51:17;D19S433:13;D21S11:32.2;D2S1338:25;D3S1358:15,16;D5S818:12;D7S820:9,12;D8S1179:13;FGA:19.2,24;TH01:9.3;TPOX:8;vWA:17,18;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞;NCI-H295R培養(yǎng)復蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞;NCI-H295R培養(yǎng)操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
CARTPT Others Human 人 CART / CARTPT 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0250801-D (人巨細胞性肺癌細胞)5×106cells/瓶×2
人腎上皮細胞cDNAHREpiC cDNA
豬細胞;ST 單核巨噬細胞白血病,RAW 264.7細胞 L615細胞,615小鼠網(wǎng)織細胞性白血病瘤株
表達小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞;293KB
HA Others H5N3 甲型流感 H5N3 (A/duck/Hokkaido/167/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
BRL 3A, 大鼠肝正常細胞 Rattus
貓源細胞
小鼠顆粒神經(jīng)元(MGC)(1×106)
雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7B5 小鼠表皮角質(zhì)形成細胞*培養(yǎng)基 100mL
人角膜細胞總RNAHK tRNA
IL1RAPL2 Others Human 人 IL1R9 / IL1RAPL2 / IL1 Receptor 9 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0250801-D (人巨細胞性肺癌細胞)5×106cells/瓶×2
CARTPT Others Human 人 CART / CARTPT 人細胞裂解液 (陽性對照)
人腎上皮細胞cDNAHREpiC cDNA
豬細胞;ST 單核巨噬細胞白血病,RAW 264.7細胞 L615細胞,615小鼠網(wǎng)織細胞性白血病瘤株
表達小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞;293KB
HA Others H5N3 甲型流感 H5N3 (A/duck/Hokkaido/167/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
Anti-PS-1/FITC 熒光素標記早老素蛋白-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG1 kappa-chain Whole serum 兔抗小鼠k-鏈抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
白介素4抗體 Anti-IL-4 0.1ml
Rabbit anti-Guinea pig IgG whole serum 兔抗豚鼠IgG抗血清 1ml
Phospho-FGFR1 (Tyr154) 英文名稱: 磷酸化堿性成纖維細胞生長因子受體1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PSD93 (Tyr340) 磷酸化突觸后密度蛋白93抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgG1 kappa-chain Whole serum 兔抗小鼠k-鏈抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
Muc-1/CD227 Anti-gen (mucin-1) 粘蛋白-1/上皮膜抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Anthrax 炭疽桿菌抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Bax(Ser184) 磷酸化Bax抗體 規(guī)格 0.1ml
兔抗人 IgA/FITC 0.2ml 綠色熒光,Dako公司
VWCE 英文名稱: VWCE抗體 0.2ml
DIRAS2 英文名稱: DIRAS2蛋白抗體 0.2ml
Anti-Anthrax 炭疽桿菌抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞;NCI-H295R培養(yǎng)Sec8 英文名稱: 胞吐分泌蛋白Sec8抗體 0.2ml
EDRF1 英文名稱: 紅細胞分化相關因子1抗體 0.2ml
組織蛋白酶H抗體 Anti-cath-H/CH 0.1ml
Anti-UMOD/FITC 熒光素標記UMOD抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Histone H3 (Thr11) 磷酸化組蛋白H3抗體 規(guī)格 0.1ml
CXCL10/IP-10 CXCL10趨化因子10/干擾素誘導蛋白10抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞;NCI-H295R培養(yǎng)現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。
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