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更新時間:2017-09-06 13:33:20瀏覽次數(shù):180次
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人結(jié)直腸癌細(xì)胞;T84培養(yǎng)凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細(xì)胞活力狀態(tài)良好的細(xì)胞株1420株,其中絕大部分是近年來從美國ATCC和NIH分批引進(jìn)的細(xì)胞種子,少部分來自全國各地細(xì)胞研究所,細(xì)胞來源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好。凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨期 |
貼壁生長 | 3-5天 |
細(xì)胞名稱 人結(jié)直腸癌細(xì)胞;T84培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣;多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 T84細(xì)胞來源于一位72歲的男性結(jié)直腸癌患者的肺部轉(zhuǎn)移灶;皮下接種至BALB/c裸鼠并連續(xù)傳代23次后建立該細(xì)胞系。在裸鼠身上傳代的過程中,該腫瘤仍保持原始的結(jié)直腸癌的組織學(xué)特性。T84細(xì)胞系生長至匯合狀態(tài)時形成單層細(xì)胞,相鄰細(xì)胞間有緊密連接和細(xì)胞橋粒;該細(xì)胞有多種肽類激素和神經(jīng)遞質(zhì)的受體,維持電解質(zhì)的定向運輸;角蛋白陽性。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:2~1:4傳代;每周2次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10;D13S317:9;D16S539:10,11;D18S51:17;D19S433:13;D21S11:31;D2S1338:23,26;D3S1358:19;D5S818:12;D7S820:8,10;D8S1179:15;FGA:24;TH01:6,9;TPOX:8,11;vWA:17,18;
同工酶
染色體 51~60
使用權(quán)限 A類
人結(jié)直腸癌細(xì)胞;T84培養(yǎng)復(fù)蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。
人結(jié)直腸癌細(xì)胞;T84培養(yǎng)操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
FAM19A4 Others Human 人 FAM19A4 / TAFA4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0226SW626(人卵巢癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人牙齦成纖維細(xì)胞cDNAHGF cDNA
豬胚胎傳代細(xì)胞;ST 子細(xì)胞,SiHa細(xì)胞 B22細(xì)胞,KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株
Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293sars181A
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人絨毛間充質(zhì)成纖維細(xì)胞 Human
荷蘭黑白花奶牛牛肺細(xì)胞;DCL1
大鼠心肌細(xì)胞(RCM)(1×106)
T739小鼠肺腺癌瘤株;LA795 小鼠腎成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人肝細(xì)胞RNAHH miRNA5 μg
EFNB1 Others Mouse 小鼠 EFNB1 / Ephrin-B1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0226SW626(人卵巢癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
FAM19A4 Others Human 人 FAM19A4 / TAFA4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人牙齦成纖維細(xì)胞cDNAHGF cDNA
豬胚胎傳代細(xì)胞;ST 子細(xì)胞,SiHa細(xì)胞 B22細(xì)胞,KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株
Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293sars181A
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
Anti-PSCA /FITC 熒光素標(biāo)記抗前列腺干細(xì)胞抗原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-pig IgG Whole serum 兔抗豬IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
生長抑制因子基因1抗體 anti-ING1/p33 0.2ml
Rabbit anti-Bovine IgM whole serum 兔抗IgM抗血清 1ml
FAN1 英文名稱: 范可尼綜合征相關(guān)蛋白FAN1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PRKD1(Tyr463) 磷酸化蛋白激酶C mu型抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-pig IgG Whole serum 兔抗豬IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
BCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein) 癌耐藥相關(guān)蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-c-Abl 非受體*激酶c-Abl抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-CHEK1(Ser317) 磷酸化細(xì)胞周期檢測點激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml
兔抗Biotin (*)血清 0.5ml 國產(chǎn)
WDR16 英文名稱: WD重復(fù)蛋白16抗體 0.2ml
Phospho-Dab1 (Ser491) 英文名稱: 磷酸化Disabled 1抗體 0.1ml
Anti-c-Abl 非受體*激酶c-Abl抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人結(jié)直腸癌細(xì)胞;T84培養(yǎng)SLC26A4 英文名稱: 鈉單獨轉(zhuǎn)運蛋白SLC26A4抗體 0.1ml
EPR1 英文名稱: 效應(yīng)細(xì)胞蛋白酶受體1抗體 0.2ml
嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白3抗體 Anti-CCL26 0.1ml
anti-VASH1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗血管抑制蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-HER3(Tyr1328) 磷酸化HER3受體抗體 規(guī)格 0.1ml
CD24 CD24抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
人結(jié)直腸癌細(xì)胞;T84培養(yǎng)現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。
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