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更新時間:2017-09-06 13:03:11瀏覽次數(shù):153次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7培養(yǎng)培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代,不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
2)公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準(zhǔn)確性。
3)從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí),僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風(fēng)險和責(zé)任,采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。
細(xì)胞名稱 雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7培養(yǎng)
形態(tài)特性 圓形
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞株由陳松森教授實(shí)驗(yàn)室建立;雙位點(diǎn)Cys151和Cys183突變的c-Kit基因轉(zhuǎn)染293ET細(xì)胞,篩選獲得。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;IL-3 or rhGM-CSF
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
F7 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0162MS1(小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人心肌細(xì)胞-裂解物HCM-a L
家豬皮膚細(xì)胞;SSC-S1 癌細(xì)胞,ZR-75-1細(xì)胞 NS1細(xì)胞,小鼠骨髓瘤細(xì)胞
腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;AAV-293
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓 Mouse
CM-R016大鼠胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人肝間充質(zhì)干細(xì)胞(肝)(HMSC-HE)(5×105)
綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細(xì)胞;MFC-GFP 小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人上皮細(xì)胞;Ca Ski
P4HB Others Mouse 小鼠 P4HB / ERBA2L 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0162MS1(小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
F7 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人心肌細(xì)胞-裂解物HCM-a L
家豬皮膚細(xì)胞;SSC-S1 癌細(xì)胞,ZR-75-1細(xì)胞 NS1細(xì)胞,小鼠骨髓瘤細(xì)胞
腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;AAV-293
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
Anti-P38 MAPK/RBITC 紅色熒光素羅丹明(RBITC)標(biāo)記原活化蛋白激酶p38抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
rec Protein G/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的重組蛋白GMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
肝細(xì)胞生長因子受體抗體 Anti-C-Met/HGFR 0.1ml
Rabbit Anti-Monkey IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗猴IgG 0.1ml
Phospho-FoxO3a (Ser318 + Ser321) 英文名稱: 磷酸化叉頭蛋白3A抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh PILR beta 細(xì)胞表面受體PILRβ抗體 規(guī)格 0.2ml
rec Protein G/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的重組蛋白GMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
HPV18 E6 人類狀瘤病毒18抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-ABCB6 ATP結(jié)合蛋白家族6抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-CHK2 (Thr68) 磷酸化細(xì)胞周期檢測點(diǎn)激酶2抗體 規(guī)格 0.1ml
兔抗豚鼠IgG血清 0.5ml 國產(chǎn)
WNT7A 英文名稱: 原癌基因wnt7a蛋白抗體 0.1ml
Phospho-DOK2 (Tyr142) 英文名稱: 磷酸化D酪酸激酶衰減蛋白2抗體 0.1ml
Anti-ABCB6 ATP結(jié)合蛋白家族6抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7培養(yǎng)phospho-SHC (Tyr427) 英文名稱: 磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 0.1ml
EBNA 3B 英文名稱: EB病毒核抗原-3B抗體 0.2ml
CD40L抗體 Anti-CD40L 0.1ml
Mouse Anti-human VEGF/FITC 熒光素標(biāo)記小鼠抗人VEGF單克隆抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-GNA12(Ser68) 磷酸化鳥苷酸調(diào)節(jié)蛋白12抗體 規(guī)格 0.1ml
Cdc34 peptide 細(xì)胞周期調(diào)控因子34抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7培養(yǎng)質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進(jìn)口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
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