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人腎皮質近曲小管上皮細胞;HK-2品牌質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,進口來源,保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
細胞名稱 人腎皮質近曲小管上皮細胞;HK-2品牌
形態(tài)特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞屬源于正常腎的近曲小管細胞,通過導入HPV-16 E6/E7基因而獲得永生化。將含有HPV-16 E6/E7基因的重組的逆轉錄病毒載體pLXSN 16 E6/E7轉染外生包裝細胞Psi-2,Psi-2細胞產生的病毒再去感染兼嗜性包裝細胞系PA317,后將PA317產生的病毒顆粒導入正常的腎皮質近曲小管細胞。盡管pLXSN 16 E6/E7中含有*抗性,但未用G418篩選轉導克隆。Southern和FISH分析顯示HK-2細胞來源于單克隆。PCR檢測證實HK-2細胞基因組中含有E6/E7基因。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:4傳代;2~3天換液1次。
傳代情況 P9
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:13;D13S317:9;D16S539:11,12;D18S51:12;D19S433:15,15.2;D21S11:28,30;D2S1338:17,25;D3S1358:16,17;D5S818:12;D7S820:10,11;D8S1179:10,14;FGA:20,22;TH01:9;TPOX:8,9;vWA:17,18;
同工酶
染色體 57~60
使用權限 A類
人腎皮質近曲小管上皮細胞;HK-2品牌細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
CLEC2D Others Rat 大鼠 CLEC2D / OCIL 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-00086T-CEM (人T細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2
滑膜細胞生長添加物SGS
PA-1細胞,人卵巢畸胎瘤細胞 Ad5DNA轉化的胚腎,HEK-293細胞 心肌細胞Many types of cells包裝:5 ×105次方(1ml)
山羊皮膚細胞;WGS1
S100B Others Human 人 S100B 人細胞裂解液 (陽性對照)
DH82 狗腎惡性組織細胞增生癥細胞
CL-0390NCI-H1703(人肺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2
人食道上皮細胞(HEEC)(5×105 )
人肺巨細胞癌低轉移細胞株;PG-LH7 大鼠表皮角化細胞*培養(yǎng)基 100mL
SV40轉染人成骨細胞;hFOB 1.19
KLK4 Others Human 人 KLK-4 / Kallikrein-4 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-00086T-CEM (人T細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2
CLEC2D Others Rat 大鼠 CLEC2D / OCIL 人細胞裂解液 (陽性對照)
滑膜細胞生長添加物SGS
PA-1細胞,人卵巢畸胎瘤細胞 Ad5DNA轉化的胚腎,HEK-293細胞 心肌細胞Many types of cells包裝:5 ×105次方(1ml)
山羊皮膚細胞;WGS1
S100B Others Human 人 S100B 人細胞裂解液 (陽性對照)
Anti-RGS5 /FITC 熒光素標記兔抗人G蛋白信號轉導調節(jié)因子5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
VIP (Vasoactive Intestinal peptide) 血管活性腸肽Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
髓鞘相關糖蛋白-a抗體 Anti-MAG-a/L-MAG 0.1ml
SOD3 英文名稱: 超氧化物歧化酶3抗體 0.1ml
FOX C2 英文名稱: 叉頭相關轉錄因子C2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PKA beta(Ser338) 磷酸化蛋白激酶Aβ抗體 規(guī)格 0.1ml
VIP (Vasoactive Intestinal peptide) 血管活性腸肽Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
GABAB1(GABAb Receptor 1) g-氨基丁酸B1受體(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CEACAM1 CEACAM1 / CD66a 鼠單抗 (PE) Human
Rhesus antibody Rh Phospho-delta Opioid Receptor (Ser363) 磷酸化D型受體抗體 規(guī)格 0.1ml
PVDF膜(15×60cm 0.45um) 1張 Pall-Gelman
ZNF268 英文名稱: 鋅指脂蛋白-1c抗體 0.1ml
DAPP1 英文名稱: B淋巴細胞銜接分子DAPP1抗體 0.2ml
CEACAM1 CEACAM1 / CD66a 鼠單抗 (PE) Human
人腎皮質近曲小管上皮細胞;HK-2品牌ZBTB4 英文名稱: 鋅指蛋白903抗體 0.2ml
Dscam 英文名稱: 唐氏綜合征細胞粘附分子抗體 0.2ml
血管緊張素Ⅱ-2型受體抗體 Anti-AT2R 0.1ml
Anti-ZNF268(1c)/FITC 熒光素標記鋅指脂蛋白-1c抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser118) 磷酸化雌激素受體α抗體 規(guī)格 0.1ml
DAD1 (dopamine D1 receptor) 多巴胺受體-D1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
人腎皮質近曲小管上皮細胞;HK-2品牌培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實現為科學研究提供實驗細胞技術服務。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關信息進行及時更新。但限于我們的技術條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉讓及使用細胞的時候要遵守國內外有關的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風險和責任,采取適當的安全和處理措施盡量降低對健康或環(huán)境的危害。
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