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更新時間:2017-07-20 10:33:49瀏覽次數:221次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網大鼠單核細胞分離液 1.082200mL操作步驟詳細說明書:
大鼠單核細胞分離液 1.082200mL操作步驟產品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產品。它具有下列特點:
1. 一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
大鼠單核細胞分離液 1.082200mL操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
大鼠單核細胞分離液 1.082200mL操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
M17瓊脂5毫升2~8℃
TrypticSoyBroth 500g/原裝2kg原裝 BD 211822
氧化酶測試盒shēng huà shì jì容量:20個/包
4-羌基-3-氧基芐安·HCl 4-xy7noxy-3-mqthoxybqnzylcminq xy7nochloridq 7149-10-
硅膠GF254shēng huà shì jì容量:1克
四化鉑shēng huà shì jì容量:保存:-20℃100毫克
2269-22-9仲丁醇鋁Aluminium tri-sec-butoxide
2-(Benzofuran-2-yl)-4,4,5,5-tetrametxyl-1,3,2-dioxaborolane 402503-13-3
三乙酸丙烯酯 Allyltrifluoroacetate,98% 383-67-5 10G 通用試劑
葡萄糖瓊脂 Nc
ATP酶測試盒(測組織及細胞膜的可測Na+K+、Ca2+Mg2+-ATP酶,樣本處理前需高速離心)500支/包
10034-99-8七水合 sulfate
基磺酸鎳100克
DL-阿拉伯糖 DL-Arabinose,≥98% 147-81-9,20235-19-2 5G 通用試劑
2-甲酯苯磺酰胺 Methyl 2-(Aminosulfonyl)benzoate,98% 57683-71-3 5G 通用試劑
PRNP Others Human 人 PRNP / Prion 人細胞裂解液 (陽性對照)
人真皮成纖維細胞-胎兒裂解物HDF-f L
人急性T淋巴細胞性白血病細胞;I 2.1(CRL-2572)
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-3C8 透明質酸酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL
A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細胞株 Human
CES2 Others Mouse 小鼠 CES2 / Carboxylesterase-2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人真皮成纖維細胞-胎兒裂解物HDF-f L
PRNP Others Human 人 PRNP / Prion 人細胞裂解液 (陽性對照)
人急性T淋巴細胞性白血病細胞;I 2.1(CRL-2572)
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-3C8 透明質酸酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL
A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細胞株 Human
CES2 Others Mouse 小鼠 CES2 / Carboxylesterase-2 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠單核細胞分離液 1.082200mL操作步驟EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0909 人軟骨細胞*培養(yǎng)基 100mL
髓核細胞培養(yǎng)基NPCM
CST1 Others Human 人 CST1 / Cystatin-1 / Cystatin-SN 人細胞裂解液 (陽性對照)
CM-M014小鼠氣管和支氣管上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
3T3-L1, 小鼠前脂肪細胞
GPH4 豚鼠心肌來源細胞
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