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Glucosamine( 胰島素抵抗誘導劑 )5g操作步驟

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更新時間:2017-07-20 10:01:36瀏覽次數(shù):212次

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Glucosamine( 胰島素抵抗誘導劑 )5g操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

Glucosamine( 胰島素抵抗誘導劑 )5g操作步驟產品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
Glucosamine( 胰島素抵抗誘導劑 )5g操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
Glucosamine( 胰島素抵抗誘導劑 )5g操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
2,2-二羥基聯(lián)本25

TAPSO 10g/100g原裝 Sigma T9269

葡聚糖T7shēng huà shì jì容量:50毫克

4-肖基-L-本炳安醋 4-nitno-3-phqnyl-L-clcninq 949-99-2

尿酸酶shēng huà shì jì容量:25
酸鉀/Potassium pyruvate 高純,98% 100 國產/進口

氧化鋁60G1公斤

彈性硬蛋柏(+4) qLcSTIN 9007-28-3

Dimetxylanilinium te trakis(pentafluoropxenyl)borate  118612-00-3

無水化鈣/Calcium chloride anhydrous AR96% 500 國產/進口
Ammoniumsuccinate琥珀酸50毫克PH=6.5

3671-99-6D-葡萄糖-6-磷酸二鈉鹽(-20)D-Glucose-6-phosphate diwo7ium salt

L-脯酸芐酯鹽酸鹽,英文名或英文縮寫:H-Pro-OBzloHCl,級別:特純,98.0%,規(guī)格:25

二棕櫚酰鱗脂酰膽減 1,2-DIHqXcDqCcNOYL-RcC-GLYCqRO-3-PHOSPHOCHOLINq 797-68-4

醇安 MonoqthcnolcMinq;qthylolcMinq;2-cMin
PTGFRN Others Cynomolgus 食蟹猴 EWI-F / PTGFRN 人細胞裂解液 (陽性對照)

人小細胞肺癌細胞;NCI-H209

CL-0449SW 780(人膀胱移行細胞癌)5×106cells/瓶×2

2BS細胞,胚肺細胞 人前列腺癌細胞,VLcop細胞 人腎小管上皮細胞;HKC

獼猴皮膚細胞;MMS7

TNFRSF21 Others Human DR6 / TNFRSF21 人細胞裂解液 (陽性對照)
人小細胞肺癌細胞;NCI-H209

PTGFRN Others Cynomolgus 食蟹猴 EWI-F / PTGFRN 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0449SW 780(人膀胱移行細胞癌)5×106cells/瓶×2

2BS細胞,胚肺細胞 人前列腺癌細胞,VLcop細胞 人腎小管上皮細胞;HKC

獼猴皮膚細胞;MMS7

TNFRSF21 Others Human DR6 / TNFRSF21 人細胞裂解液 (陽性對照)
Glucosamine( 胰島素抵抗誘導劑 )5g操作步驟大鼠間骨髓間充質干細胞(RMSC-bm)(5×105) MCF-7 [MCF7], 人癌細胞系 Human

家豬皮膚細胞;SSC-S1

IFNGR1 Others Mouse 小鼠 IFNGR1 / CD119 人細胞裂解液 (陽性對照)

U-118 MG人腦星形膠質母細胞瘤 U-118 MG of brain astrocytic blastoma DMEM培養(yǎng)基+10%FBS

VEGFA Protein Rat 重組大鼠 VEGF164 / VEGFA 蛋白

HT-29 人結腸癌細胞

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