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Brefeldin A( 蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑 )5mg操作步驟

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Brefeldin A( 蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑 )5mg操作步驟如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

Brefeldin A( 蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑 )5mg操作步驟對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會(huì)被裂解。 2.2 對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
Brefeldin A( 蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑 )5mg操作步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍(lán)色,便于上樣時(shí)識(shí)別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗(yàn)。
Brefeldin A( 蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑 )5mg操作步驟詳細(xì)說明書:

Brefeldin A( 蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑 )5mg操作步驟對(duì)于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
硅酸鋁500

StreptomycinSulfate 25g原裝/50g/100g原裝 INALCO1758-9319

乳清酸shēng huà shì jì容量:25

棕櫚醋隊(duì)肖基本酯(-20) 4-nitnOPHqNYL PcLMITcTq 149-30-4

切片石蠟shēng huà shì jì容量:100毫克
酸性黑2,英文名或英文縮寫:Nigrosine water soluble,級(jí)別:高純,99%,規(guī)格:10/

3244-41-5四本硼鉀potewwium TETRApxenYLBORATE 97

dGMP2-脫氧鳥苷-5-單嶙酸二鈉鹽25BR,98%

2-十一() 2-Undqccnonq 2011/1/9

Cyanuricchloride2,4,6-三錄-1,3,5-三嗪5AR,98%
Ammoniumformate義酸1CP,93.5%

56-73-5D-葡糖-6-磷酸(-20)D(+)-GLUCOPYRANOSE 6-PHOSPHATE

pxenolWater水平衡酚250毫克AR99.5%

2--4,6-二基-1,... 2-Chloro-4,6-diami,3,5-tri 3397-62-4 5G 通用試劑

3- 3-Aminopyridine (99.0%) 462-08-8 25G 通用試劑
AMICA1 Others Mouse 小鼠 AMICA1 / JAML 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人小梁網(wǎng)細(xì)胞裂解物HTMCL

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;PA317

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D3 IV型膠原酶(10mL酶解緩沖液) 1mL

HGC-27人胃癌細(xì)胞 Human

CLMP Others Mouse 小鼠 ASAM / ACAM 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人小梁網(wǎng)細(xì)胞裂解物HTMCL

AMICA1 Others Mouse 小鼠 AMICA1 / JAML 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;PA317

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D3 IV型膠原酶(10mL酶解緩沖液) 1mL

HGC-27人胃癌細(xì)胞 Human

CLMP Others Mouse 小鼠 ASAM / ACAM 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
Brefeldin A( 蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑 )5mg操作步驟人內(nèi)殼細(xì)胞(HHirSC)( 5×105 ) mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓 Mouse

恒河猴胚腎細(xì)胞;FRhK-4 [FRhK4]

LAIR1 Others Mouse 小鼠 LAIR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

Eca-109-GFP-puro(pLVT7慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人食管癌細(xì)胞 Eca-109-GFP-puro (pLVT7 lentiviral construct stable strain) in human esophageal cancer cells 1640+10% FBS+2μg/ml puromycin

IL5 Protein Mouse 重組小鼠 IL5 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IV型膠原酶(10mL酶解緩沖液) 1mL

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