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ER-Tracker Red( 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)紅色熒光探針 )20μL操作步驟

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更新時間:2017-07-20 09:23:25瀏覽次數(shù):470次

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ER-Tracker Red( 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)紅色熒光探針 )20μL操作步驟如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

ER-Tracker Red( 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)紅色熒光探針 )20μL操作步驟詳細(xì)說明書:

ER-Tracker Red( 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)紅色熒光探針 )20μL操作步驟產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍(lán)色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
ER-Tracker Red( 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)紅色熒光探針 )20μL操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
ER-Tracker Red( 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)紅色熒光探針 )20μL操作步驟對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
三四胺六乙酸1

(鮭魚精DNA)

無水亞鉀shēng huà shì jì容量:RT250

信號通路抑制劑(NVP-AUY922) 5-[2,4-Dixy7noxy-5-isopropylphqnyl]-N-qthyl-4-[4-(4-morpholinylmqthyl)phqnyl]-3-isoxczolqccrboxcmidq 74741-49-3

吐溫60shēng huà shì jì容量:25
苔紅素,英文名或英文縮寫:Orcein,級別:AR,85%,規(guī)格:500毫克

碳醋輕內(nèi);小蘇打;重曹;焙減 wo7ium Biccronctq (cS);Bcking sodc 144-22-8

3-Oxo-2H,4H-benzo[b][1,4]oxezine-6-boronic acid pinacol ester 943994-02-3

對羧基苯磺酰胺 4-Sulfamylbenzoic acid,95% 138-41-0 25G 通用試劑

DL-纈酸/DL-α-基異戊酸/DL-2--3-甲基丁酸
Alkalinetransfersolution堿性轉(zhuǎn)化液12.5N,200

3087-39-6四叔丁基鈦酸酯Tetra-tert-butyl orthotitanate

metxyl 5-nitnothiopxene-2-carboxylate 5832-1-9

十七酸甲酯 Methyl heptadecanoate,99% 1731-92-6 250MG 通用試劑

N-芴氧羰?;?/span>-D-本炳安醋 Nc
IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHRGEC cDNA

tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B);Pan02-CAG-tTA-2D1

QGY-7701細(xì)胞,人肝癌細(xì)胞 人羊膜細(xì)胞,HA細(xì)胞 大鼠癌細(xì)胞;SHZ-88

KG-1(人急性骨髓性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

Promocell C-25215 Hepatocyte Basal Medium (prf), 肝細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基,無酚紅 500ml
人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHRGEC cDNA

IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B);Pan02-CAG-tTA-2D1

QGY-7701細(xì)胞,人肝癌細(xì)胞 人羊膜細(xì)胞,HA細(xì)胞 大鼠癌細(xì)胞;SHZ-88

KG-1(人急性骨髓性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

Promocell C-25215 Hepatocyte Basal Medium (prf), 肝細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基,無酚紅 500ml
ER-Tracker Red( 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)紅色熒光探針 )20μL操作步驟人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SH-SY5Y 人牙周膜成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

人小腦顆粒細(xì)胞HCGC

CD276 Others Human CD276 / B7-H3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CM-H043人肝實質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

SK-MEL-1, 人皮膚黑色素瘤細(xì)胞

L929 小鼠成纖維細(xì)胞

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