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DAF-FM DA(NO 熒光探針 )100 次操作步驟

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更新時間:2017-07-20 09:14:42瀏覽次數(shù):162次

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DAF-FM DA(NO 熒光探針 )100 次操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

DAF-FM DA(NO 熒光探針 )100 次操作步驟詳細說明書:

DAF-FM DA(NO 熒光探針 )100 次操作步驟產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
DAF-FM DA(NO 熒光探針 )100 次操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
DAF-FM DA(NO 熒光探針 )100 次操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
N-羥基-5-降*烯-23-25RT

(*)

亞鐵瓊脂shēng huà shì jì容量:100

5--6--3-吲哚忻酯 98.0% (HPLC) 5-BROMO-6-CHLORO-3-INDOLYL CcPRYLcTq 09347-94-4

細胞活性鑒別染液shēng huà shì jì容量:20/
鉭粒shēng huà shì jì容量:25

乙基羅丹明B;乙基玫瑰紅B;若丹明B乙酯etxylrhodaMine B;

玉米素shēng huà shì jì容量:25

2--5-乙?;?/span> 2-Bromo-5-Acetylpyridine,97% 139042-59-4 1G 通用試劑

果膠酶/粘膠質(zhì)酶/果膠甲脂酶/聚半乳糖醛酸酶/Pectinase BR,500u/mg 25 國產(chǎn)/進口
Alginicacid藻朊酸250毫克超純,99%

70-47-3L-天冬酰胺;L-天冬堿;L-天冬素;L-酰胺天冬酸;L-天*;L-2-基琥珀酸酰胺L-Asparagine;L-β-Asparagine;L-AMinosuccinaMic acid;L-Aspartic acid β-MonoaMide;β-AMide of aspartic acid

Oxacillinwo7iumsalt本唑*143000200000,粉末,5條帶

吩噁嗪 Phenox,96.0% 135-67-1
LILRA3 Others Human ILT6 / LILRA3 人細胞裂解液 (陽性對照)

人腎皮質(zhì)上皮細胞RNAHRCEpiC miRNA5 μg

新生牛眼Tenon's囊成纖維細胞;NBTF

HCT-15細胞,人結(jié)直腸腺癌細胞 人眼脈絡(luò)黑色素瘤細胞,OCM-1細胞 人結(jié)直腸腺癌細胞;LoVo

Hepa 1-6(小鼠肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2

ACVR1 Others Human ALK-2 / ACVR1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人腎皮質(zhì)上皮細胞RNAHRCEpiC miRNA5 μg

LILRA3 Others Human ILT6 / LILRA3 人細胞裂解液 (陽性對照)

新生牛眼Tenon's囊成纖維細胞;NBTF

HCT-15細胞,人結(jié)直腸腺癌細胞 人眼脈絡(luò)黑色素瘤細胞,OCM-1細胞 人結(jié)直腸腺癌細胞;LoVo

Hepa 1-6(小鼠肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2

ACVR1 Others Human ALK-2 / ACVR1 人細胞裂解液 (陽性對照)
DAF-FM DA(NO 熒光探針 )100 次操作步驟人羊膜細胞;WISH SGC-7901, 人胃腺癌細胞系 Human

T739小鼠肺腺癌瘤株;LA795

CD6 Others Mouse 小鼠 CD6 / TP120 人細胞裂解液 (陽性對照)

MDA-MB-231人癌細胞 Human breast cancer cell line MDA-MB-231 L-15+10% Hyclone FBS

TDGF1 Protein Rat 重組大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (Fc 標簽)

LS174T 人結(jié)腸癌細胞

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