5-Carboxyfluorescein succinimidyl ester10mg操作步驟詳細說明書：

5-Carboxyfluorescein succinimidyl ester10mg操作步驟產(chǎn)品及特點：
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法，但是單獨配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1. 一站式，即開即用，用戶不需單獨準備各種成分，十分方便。
2. 安全，將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活，分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE，滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液，由于其含有染料，制備的濃縮膠呈藍色，便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
5-Carboxyfluorescein succinimidyl ester10mg操作步驟對于組織樣品：
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小，可以適當剪切后直接加入裂解液裂解，通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便，不必使用勻漿器，缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
5-Carboxyfluorescein succinimidyl ester10mg操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品：
1. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后，細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細胞/管， 然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
十四烷基*基溴化50克

(派洛寧B)

移液器P5000shēng huà shì jì容量：RT，避光100克

5-錄水楊醋;5-錄-2-羌基本加醋 5-Chlorosclicylic ccid;5-Chloro-2-xy7noxybqnzoic ccid 31-14-

鹽酸丫啶shēng huà shì jì容量：2～8℃250克
碳酸酐酶(牛紅血球)shēng huà shì jì容量：25克

105-66-8正丁酸正丙酯Propyl butyrate

5-morpholinothiopxene-2-carboxylic acid 332345-27-4

*基硅基異酸酯 Trimethylsilyl isocyanate,85% 1118-02-1 10G 通用試劑

培養(yǎng)基Egg　yolk　emulsion　steril Nc
AgDDTC砷試劑25克高純，98%

558-13-4四溴化碳;四溴甲烷enpon tetrabroMide

6-metxylBenzo[b]thiopxene 16587-47-6

抗氧劑1076 Irganox 1076,99% 2082-79-3 25G 通用試劑

N-芴氧羰?；?/span>-D-亮安醋 Nc
IL11RA Others Canine 狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 人細胞裂解液 (陽性對照)

人神經(jīng)元cDNAHN cDNA

615小鼠網(wǎng)織細胞性白血病瘤株;L615

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-C2 II型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL

NCI-N87 [N87]人胃癌細胞 Human

IL12RB1 Others Human 人 IL12RB1 / IL12RB / CD212 人細胞裂解液 (陽性對照)
人神經(jīng)元cDNAHN cDNA

IL11RA Others Canine 狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 人細胞裂解液 (陽性對照)

615小鼠網(wǎng)織細胞性白血病瘤株;L615

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-C2 II型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL

NCI-N87 [N87]人胃癌細胞 Human

IL12RB1 Others Human 人 IL12RB1 / IL12RB / CD212 人細胞裂解液 (陽性對照)
5-Carboxyfluorescein succinimidyl ester10mg操作步驟AHSG Others Mouse 小鼠 Fetuin-A / AHSG 人細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠網(wǎng)織細胞肉瘤;M5076

NRG1 Others Canine 狗 NRG1-alpha (EGF Domain) 人細胞裂解液 (陽性對照)

96-C細胞，低轉移肺癌細胞 人前列腺癌細胞,PC-3細胞 人膀胱基質成纖維細胞總RNAHBdSF tRNA

非洲綠猴腎細胞系/HCV-p7;Vero-HCV-p7

MCF-7 [MCF7], 人癌細胞系