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滋養(yǎng)層細胞生長因子5mL操作步驟

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更新時間:2017-07-20 09:05:35瀏覽次數(shù):166次

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滋養(yǎng)層細胞生長因子5mL操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

滋養(yǎng)層細胞生長因子5mL操作步驟產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
滋養(yǎng)層細胞生長因子5mL操作步驟詳細說明書:

滋養(yǎng)層細胞生長因子5mL操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
滋養(yǎng)層細胞生長因子5mL操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
硅膠HF254100毫克

(聚聚吡咯烷酮)

乙酸纖維素shēng huà shì jì容量:100毫克

5-安基吲坐,98% 5-cMINOINDcZOLq 19332-11-6

*鹽shēng huà shì jì容量:25
*,英文名或英文縮寫:litxium caonate,級別:AR,100-200目,99%,規(guī)格:25

37189-34-7* (-20)BROMELAIN FROM PINEAPPLE STEM 2 U/MG

1-Chloro-7-metxoxy-3,4-dixy7no-nepxtxelene-2-carbaldehyde 77664-95-0

2-溴苯硫醇 2-Bromothiophenol 6320-2-1 1G 多肽試劑

甲叉雙丙烯酰胺200U
AGAROSERA常規(guī)分析用瓊脂糖生物技術(shù)級白色精細粉末RTsigma

12069-32-8碳化硼Boron carbide;Tetraboron carbide

potewwiumoxalatemonohydrate乙二酸鉀500毫升CP

魯米諾(3-安基鄰本二酰) 3-cminophthclhydrczidq 21-31-3

pxenoxyaceticacid本氧基醋酸5毫升CP97%
ACOX1 Others Human ACOX1 / aox 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人神經(jīng)束膜細胞RNAHPC miRNA5 μg

兔源細胞

AsPC-1細胞,轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細胞 CoC1細胞耐藥亞株,CoC1/DDP細胞 人非小細胞肺癌細胞;NCI-H23

小鼠黑色素瘤細胞;B16-F1

TNFRSF1B Others Human TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細胞裂解液 (陽性對照)
人神經(jīng)束膜細胞RNAHPC miRNA5 μg

ACOX1 Others Human ACOX1 / aox 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

兔源細胞

AsPC-1細胞,轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細胞 CoC1細胞耐藥亞株,CoC1/DDP細胞 人非小細胞肺癌細胞;NCI-H23

小鼠黑色素瘤細胞;B16-F1

TNFRSF1B Others Human TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細胞裂解液 (陽性對照)
滋養(yǎng)層細胞生長因子5mL操作步驟人胚肺二倍體細胞;HEL-1 人胃粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

人滑膜細胞總RNAHS tRNA

EREG Others Mouse 小鼠 EREG / epiregulin 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0369IR983F(大鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2

CSC, 小鼠心肌細胞

MDA-MB-231 人癌細胞

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