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成骨細胞生長因子5mL操作步驟

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更新時間:2017-07-20 08:42:36瀏覽次數(shù):145次

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成骨細胞生長因子5mL操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

成骨細胞生長因子5mL操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
成骨細胞生長因子5mL操作步驟產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
成骨細胞生長因子5mL操作步驟詳細說明書:

成骨細胞生長因子5mL操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
焦嶙酸鉀25

(猩紅S)

羧酸鉻,英文名或英文縮寫:Chromium picolinate,級別:AR,98%,規(guī)格:100微升

6-安己晴 6-cMINO CcPROnitnILq 43-74-8

碳酸鈰(),英文名或英文縮寫:Cerium caonate hydrate,級別:5N,規(guī)格:100
天青A,英文名或英文縮寫:Azure II,級別:高純,99%,規(guī)格:5

1493-13-6三扶甲烷磺酸Trifluorometxanesulfonic acid

CYCLO-PREPPCRCLEANUPKITPCR產(chǎn)物純化試劑盒生物技術(shù)級RTsigma

2-己烯醛 trans-2-Hexen-1-al,98% 6728-26-3 25ML 通用試劑

*/二鹽基磷酸鉀/雙鹽基磷酸鉀/磷酸二鉀/DKP AR,99% 500 國產(chǎn)/進口
AGAR,BACTERIOLOGICAL細菌瓊脂細菌學(xué)級2.5KG9002-18-0RT

79-21-0過氧乙酸(A B)Peroxyacetic acid

DL-HomocysteineDL-2--4-巰基丁酸25BR,95%

羧甲基殼聚糖 Carboxymethyl Chitosan,羧化度≥80% 83512-85-0 100G 通用試劑

固黑G Fcst blcck G sclt;C.I. 37260;
ALCAM Others Rat 大鼠 ALCAM / CD166 人細胞裂解液 (陽性對照)

人絨毛膜滋養(yǎng)層細胞HVT

大鼠腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

A-375人惡性黑色素瘤細胞 A-375 human malignant melanoma cells DMEM+10% FBS

BTC Protein Mouse 重組小鼠 BTC / Betacellulin 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

293E(人胚腎細胞(EBNA1基因修飾)) 5×106cells/瓶×2 原代神經(jīng)膠質(zhì)細胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml
人絨毛膜滋養(yǎng)層細胞HVT

ALCAM Others Rat 大鼠 ALCAM / CD166 人細胞裂解液 (陽性對照)

大鼠腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

A-375人惡性黑色素瘤細胞 A-375 human malignant melanoma cells DMEM+10% FBS

BTC Protein Mouse 重組小鼠 BTC / Betacellulin 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

293E(人胚腎細胞(EBNA1基因修飾)) 5×106cells/瓶×2 原代神經(jīng)膠質(zhì)細胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml
成骨細胞生長因子5mL操作步驟人浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細胞;CCD-1095Sk 人成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL

雙位點HC-kit受體細胞株;DMF7

PTH1R Others Human PTH1R / PTHR1 / PTH1 Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照)

SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌細胞

THPO Protein Human 重組人 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標(biāo)簽)

NCI-H1650 人非小細胞肺癌細胞

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