脂蛋白 PAGE 染液1套操作步驟詳細(xì)說明書：

脂蛋白 PAGE 染液1套操作步驟產(chǎn)品及特點(diǎn)：
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法，但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1. 一站式，即開即用，用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分，十分方便。
2. 安全，將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活，分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE，滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液，由于其含有染料，制備的濃縮膠呈藍(lán)色，便于上樣時(shí)識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗(yàn)。
脂蛋白 PAGE 染液1套操作步驟對于組織樣品：
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解，通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便，不必使用勻漿器，缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
脂蛋白 PAGE 染液1套操作步驟對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品：
1. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后，細(xì)胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管， 然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
DL-乳酸鈉5克2～8℃

(多聚蛋白胨)

二乙基乙酰與米酸酯，英文名或英文縮寫：Dietxyl acetamidomalonate，級別：BR，99%，規(guī)格：5毫克

2，2-二羌基二流代-6，6-聯(lián) 6-xy7noXY-2-NcPHTHYL DISULFIDq 6088-21-3

聚醇縮甲醛，英文名或英文縮寫：PVF，級別：AR，99%，規(guī)格：5克
天青IIshēng huà shì jì容量：1公斤

4033-27-6二氫* ≥90%(-20°C)DIxy7noFOLIC ACID

2-Aceryl-5-Bromo-6-metxoxynepxtxelene 84167-74-8

1-甲基吲哚 1-Methylindole,≥97.0% 603-76-9 5G 多肽試劑

硅酸鋅25克RT，避光
AEC3-基-N-乙基咔唑25克AR，98%

139-33-3四乙酸二鈉etxylenedinitnilotetraacetic acid diwo7ium salt dihydrate

肌酸，英文名或英文縮寫：Creatine Monohydrate，級別：BR，99%，規(guī)格：25克

1.2-丁二醇 1,2-BUTcNqDIOL 284-03-

三氧化鉬 Molybdqnum trioxidq 1313-7-2
EREG Others Human 人 Epiregulin / EREG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人絨毛間葉成纖維細(xì)胞總RNAHVMF tRNA

Eca-109 人食管癌細(xì)胞

CL-0393NCI-H209(人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞

人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5538LC 人肝動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人絨毛間葉成纖維細(xì)胞總RNAHVMF tRNA

EREG Others Human 人 Epiregulin / EREG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

Eca-109 人食管癌細(xì)胞

CL-0393NCI-H209(人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞

人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5538LC 人肝動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
脂蛋白 PAGE 染液1套操作步驟人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92MI [NK92MI] 人前列腺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]

CD83 Others Mouse 小鼠 CD83 / HB15 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

NCI-N87 [N87]人胃癌細(xì)胞

人臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞

NCI-H345(懸浮) 小細(xì)胞肺癌