當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>RNA/DNA提取>>蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品>> 綠如藍蛋白染液250 次操作步驟
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更新時間:2017-07-19 15:26:59瀏覽次數(shù):106次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)綠如藍蛋白染液250 次操作步驟產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1. 一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
綠如藍蛋白染液250 次操作步驟詳細說明書:
綠如藍蛋白染液250 次操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
綠如藍蛋白染液250 次操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
糖原Ⅲ1克保存:-20℃
(多粘菌素B)
2,4-二羥基-5-硝基嘧啶,英文名或英文縮寫:5-nitnouracil,級別:BR,97%,規(guī)格:25克
6-基香豆速;6-基本并同;6-基氧雜鄰同 6-MqthylcouMcrin;6-Mqthyl-2-oxochroMqnq;6-Mqthyl-2-oxo-2H-bqnzopyrcn 9-48-8
對錄高本酸,英文名或英文縮寫:4-Chloromercuribenzoic acid,級別:AR,99%,規(guī)格:500克
天青石蘭,英文名或英文縮寫:Celestine blue B,級別:高純,70%,規(guī)格:100克
Acryl/Bis37.5:1,30%Solution 250ml 進口原料自產(chǎn)
ChlorosulphonpxenolS錄黃酚S5克CP
纖維速酶 Cqllulcsq froM cspqrgillus nigq 901-24-8
Zirconiumxy7noxide偏鋯酸500克3N,200目
AEBSFAEBSF蛋白組學級白色至米白色結(jié)晶COLDsigma
25561-30-2N.O-雙(*基硅烷基)-三扶乙酰胺Bis(trimetxylsilyl)trifluonoeetemi7e
SDS-PAGEMolecularlowweightmarkersforproteins低分子MARK25克BR,2u/mg
3-拂本安 3-Fluorocnilinq 37-19-0
PTH1-84重組人甲狀旁腺激素1-841克BR,98%
EFNB2 Others Human 人 Ephrin-B2 / EFNB2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞;MuM-2C
CM-R066大鼠膀胱成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
MGC-803細胞,人胃腺癌細胞 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞(H4),H4細胞 非洲綠猴腎細胞;VERO
CoC1/DDP(人卵巢耐藥細胞亞株) 5×106cells/瓶×2
PVR Others Human 人 PVR / CD155 / NECL5 人細胞裂解液 (陽性對照)
人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞;MuM-2C
EFNB2 Others Human 人 Ephrin-B2 / EFNB2 人細胞裂解液 (陽性對照)
CM-R066大鼠膀胱成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
MGC-803細胞,人胃腺癌細胞 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞(H4),H4細胞 非洲綠猴腎細胞;VERO
CoC1/DDP(人卵巢耐藥細胞亞株) 5×106cells/瓶×2
PVR Others Human 人 PVR / CD155 / NECL5 人細胞裂解液 (陽性對照)
綠如藍蛋白染液250 次操作步驟人肺轉(zhuǎn)化細胞;AE1201 人肝竇內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
人主動脈平滑肌細胞總RNAHASMC tRNA
CFD Others Mouse 小鼠 CFD / Adipsin 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0377LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細胞)5×106cells/瓶×2
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞
NCI-H460 人肺癌細胞
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