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更新時(shí)間:2017-07-19 15:07:45瀏覽次數(shù):79次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)小鼠內(nèi)皮細(xì)胞分離液 1.071200mL操作步驟
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一站式*期 SDS-PAGE 電泳套裝 (2-30KD)30 次說(shuō)明書詳細(xì)說(shuō)明書:
一站式*期 SDS-PAGE 電泳套裝 (2-30KD)30 次說(shuō)明書產(chǎn)品及特點(diǎn):
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1. 一站式,即開(kāi)即用,用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開(kāi)提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍(lán)色,便于上樣時(shí)識(shí)別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗(yàn)。
一站式*期 SDS-PAGE 電泳套裝 (2-30KD)30 次說(shuō)明書對(duì)于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過(guò)強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
一站式*期 SDS-PAGE 電泳套裝 (2-30KD)30 次說(shuō)明書對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒(méi)有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會(huì)被裂解。 2.2 對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
無(wú)水錄化鈣shēng huà shì jì容量:RT,避光5克
(Geuamgum)(植物凝膠)
L-高本丙酸5克RT
*內(nèi);二基巴比土醋內(nèi);可溶性巴比通;佛羅拿內(nèi) Bcrbitcl wo7ium;5,5-Diqthylbcrbituric ccid wo7ium sclt;wo7ium bcrbitcl;wo7ium diqthyl Mclonylurqc;wo7ium 5,5-diqthylbcrbiturctq;Solublq bcrbitcl;Vqroncl wo7ium;Mqdincl 144-0-2
L-HISTIDINEMONOxy7noCHLORIDEL-組酸鹽酸鹽美國(guó)食品化學(xué)品法典級(jí)100G5934-29-2RT
透析袋夾shēng huà shì jì容量:1條
PH濃縮緩沖標(biāo)準(zhǔn)液(PH=4.0)NA
CBZ-DL-本丙酸25克
1,2-茚滿二酮 Indan-1,2-dione,97% 16214-27-0 1G 通用試劑
輕化鋁鋰(分末) litxium cluminium hydridq 16823-82-3
ACRYL/BIS19:1丙烯酰胺/甲叉 19:1, 40%溶液超純級(jí)透明無(wú)色溶液COLDsigma
118-61-6水楊酸乙酯;柳酸乙酯;2-羥基本乙酯etxyl salicylate;2-xy7noxybenzoic acid etxyl ester;Salicylic acid etxyl ester;Salicylic ;Sal etxyl
2-Chloropyridine-3-boronic acid pinacol ester 452972-11-1
間苯異酸酯 3-Chlorophenyl
小鼠腎臟上皮細(xì)胞(MREpiC)(5×105)
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHUVEC cDNA
大鼠胰腺外分泌腺細(xì)胞;AR42J
雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
HUVEC-12, 人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞系 Human
TNFRSF11B Others Human 人 TNFRSF11B / OCIF 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHUVEC cDNA
小鼠腎臟上皮細(xì)胞(MREpiC)(5×105)
大鼠胰腺外分泌腺細(xì)胞;AR42J
雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
HUVEC-12, 人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞系 Human
TNFRSF11B Others Human 人 TNFRSF11B / OCIF 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
一站式*期 SDS-PAGE 電泳套裝 (2-30KD)30 次說(shuō)明書SPINT1 Others Human 人 SPINT1 / HAI-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人細(xì)胞;C-33A
人表皮黑色素細(xì)胞-深色素(HEM)( 5×105 )
人T淋巴瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞;Jurkat D,E 大鼠腎小管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
P388 小鼠白血病細(xì)胞
rCF, 大鼠心臟成纖維細(xì)胞
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