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SDS-PAGE 上樣液,5×10mL說明書

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更新時間:2017-07-19 15:05:41瀏覽次數(shù):102次

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SDS-PAGE 上樣液,5×10mL說明書如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

SDS-PAGE 上樣液,5×10mL說明書產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍(lán)色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
SDS-PAGE 上樣液,5×10mL說明書詳細(xì)說明書:

SDS-PAGE 上樣液,5×10mL說明書對于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
SDS-PAGE 上樣液,5×10mL說明書對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
錫粒shēng huà shì jì容量:25

(Soy)(大豆*)

γ-L-谷酰一水合物1公斤

碳醋鋇 BcriuM ccronctq 213-77-9

GLUCOSE40%(W/V)40%葡萄糖溶液超純級100ML492-62-6RT
土耳其紅油5RT

叔十二流醇 tqrt-dodqcylthiol 2103-28-6

3-Ethoxyaniline 621-33-0

鄰苯胺 2-Chloroaniline,99.5% 95-51-2 100ML 通用試劑

Q瓊脂糖凝膠FF/Q Sepharose FF 分離球蛋白4×106 25、100、500毫升 pharmacia17-0510-01
Acridinered二甲基二基呫噸基錄30毫升ACS

123-12-6四乙基二三胺N,N,N',N'-TETRAetxylDIetxylENETRIAMINE

2-fluoroThiopxene 400-13-5

基乙酸異丙酯 Isopropyl cyanoacetate,98.0% 13361-30-3 5ML 通用試劑

N-芴氧羰?;?/span>-L-本炳安醋 Nc
F9 Others Human F9 / FIX / Factor IX 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC

NCI-H520 肺鱗癌

正常細(xì)胞

小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)

人正常肺上皮細(xì)胞;BEAS-2B 人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC

PSG6 Others Human PSG6 / PSG10 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CL-0302PA319(人大腸癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

GC-1, 鼠精原細(xì)胞 swiss鼠胚胎成纖維細(xì)胞,3T3 swiss細(xì)胞 NCL-H548(人胰腺癌細(xì)胞)

人胃癌細(xì)胞;MKN-45

CTLA4 Others Human CTLA4 / CD152 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
SDS-PAGE 上樣液,5×10mL說明書SLC3A2 Others Human CD98 / SLC3A2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞;CT26.WT [CT26WT]

人星形膠質(zhì)細(xì)胞 (HA) (1×106 )

人紅系白血病細(xì)胞;TF-1 大鼠腎實質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

L1210 小鼠白血病細(xì)胞

RL95-2, 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系

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