SDS-PAGE 上樣液，5×1mL操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品：
1. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后，細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細胞/管， 然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
SDS-PAGE 上樣液，5×1mL操作步驟產(chǎn)品及特點：
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法，但是單獨配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1. 一站式，即開即用，用戶不需單獨準備各種成分，十分方便。
2. 安全，將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活，分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE，滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液，由于其含有染料，制備的濃縮膠呈藍色，便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
SDS-PAGE 上樣液，5×1mL操作步驟詳細說明書：

SDS-PAGE 上樣液，5×1mL操作步驟對于組織樣品：
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小，可以適當剪切后直接加入裂解液裂解，通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便，不必使用勻漿器，缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
*1公斤

Phosphatidylcholine 25g/100g/500g/1kg原裝 Sigma P5638

聚醇嶙酸，英文名或英文縮寫：Ammonium alcohol polyvinyl phosphate，級別：CP，98%，規(guī)格：1克

錄化鋇二水合物 ≥99% Bcrium chloridq dihydrctq 1036-7-9

本二酸氫鉀，英文名或英文縮寫：potewwium xy7nogen phthalate，級別：CP，97%，規(guī)格：100克
土耳其紅油shēng huà shì jì容量：RT5克

34803-66-21-(2-) 99%1-(2-Pyridyl)piper

安息香醛，英文名或英文縮寫：benzdehyde，級別：CP，98.5%，規(guī)格：10毫升

乙酰基二茂鐵 Acetylferrocene ,≥95.0% 1271-55-2 5G 通用試劑

6--1-己烯 6-Chloro-1-hexene (96%) 928-89-2 5G 通用試劑
Acridineorange吖啶橙1克AR，99%

68308-36-1黃豆粉Soya bean Meal;

Cyclohexanone環(huán)已酮25克AR，99.8%

無水碳酸鉀 Potassium te,≥99.0% 584-08-7 100G 通用試劑

(S)-(-)-2-基丁烷 (S)-(+)-sec-Butylamine,99% 513-49-5 250MG 通用試劑
人肺微血管內(nèi)皮細胞 (HPMEC)( 5×105 )

人臍靜脈內(nèi)皮細胞(人膀胱癌細胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]

CL-0341H22(小鼠肝癌細胞)5×106cells/瓶×2

人髓母細胞瘤細胞;Daoy 大鼠成骨細胞*培養(yǎng)基 100mL

FO 小鼠骨髓瘤細胞

SERPINA12 Others Human 人 Vaspin / SerpinA12 人細胞裂解液 (陽性對照)
人臍靜脈內(nèi)皮細胞(人膀胱癌細胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]

人肺微血管內(nèi)皮細胞 (HPMEC)( 5×105 )

CL-0341H22(小鼠肝癌細胞)5×106cells/瓶×2

人髓母細胞瘤細胞;Daoy 大鼠成骨細胞*培養(yǎng)基 100mL

FO 小鼠骨髓瘤細胞

SERPINA12 Others Human 人 Vaspin / SerpinA12 人細胞裂解液 (陽性對照)
SDS-PAGE 上樣液，5×1mL操作步驟CDNF Others Mouse 小鼠 CDNF / ARMETL1 人細胞裂解液 (陽性對照)

人結直腸腺癌細胞;HCT 116 [HCT116]

人成纖維母細胞-胎兒(HDF-f)( 5×105 )

人T淋巴瘤細胞Jurkat亞系;Jurkat77 大鼠腎成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL

P815 小鼠肥大細胞癌細胞

RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元