SDS-PAGE 預(yù)制膠12 塊操作步驟詳細(xì)說明書：

SDS-PAGE 預(yù)制膠12 塊操作步驟產(chǎn)品及特點(diǎn)：
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法，但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1. 一站式，即開即用，用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分，十分方便。
2. 安全，將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活，分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE，滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液，由于其含有染料，制備的濃縮膠呈藍(lán)色，便于上樣時(shí)識(shí)別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗(yàn)。
SDS-PAGE 預(yù)制膠12 塊操作步驟對(duì)于組織樣品：
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解，通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便，不必使用勻漿器，缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
SDS-PAGE 預(yù)制膠12 塊操作步驟對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品：
1. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對(duì)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后，細(xì)胞就會(huì)被裂解。 2.2 對(duì)于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管， 然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
FMOC-D-亮酸10克RT

Phosphatidylcholine 25mg/100mg/250mg Sigma P4279

嶙酸甲酯，英文名或英文縮寫：TMP，級(jí)別：試劑級(jí)，98%，規(guī)格：25克

肖醋鋇 BcriuM nitnctq 100-31-8

鉍鉛錫鎘合金，英文名或英文縮寫：Wood's metal，級(jí)別：AR，98%，規(guī)格：100克
吐混80，英文名或英文縮寫：Tween 80，級(jí)別：BR，99%，規(guī)格：100毫克

1398-61-4甲殼素;甲殼質(zhì);殼素;明角質(zhì);殼蛋白;殼多糖;幾丁質(zhì);聚乙?；咸?/span>Chitin;Poly(N-acetyl-1,4-β-D-glucopyranosaMine;Poly-(1→4)-β-D-N-acetylglucosaMine

花寶1號(hào)，英文名或英文縮寫：N-P-K(7-6-19)，級(jí)別：超純，99%，規(guī)格：1KU

二甲基砜 Dimethyl sulfone,98% 67-71-0 100G 通用試劑

A-CHYMOTRYPSINα -*高純級(jí)白色結(jié)晶粉末FROZENsigma

4097-22-7地丹諾辛相關(guān)物質(zhì)BDidanosine Related CoMpound B;2',3'-dideoxyadenosine

2-(Morpholinometxyl)pxenylboronic acid 223433-45-2

乙酸香蘭素酯 Vanillin acetate,≥98% 881-68-5 25G 通用試劑

糖元染液/糖原染液/PAS Stain 染色 40毫升 國(guó)產(chǎn)
EPCAM Others Rat 大鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞HUASMC

大鼠食管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

OVCAR-3人卵巢癌細(xì)胞 Human ovarian cancer cell line OVCAR-3 1640+10%FBS

EREG Protein Mouse 重組小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 嬰兒真皮成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞HUASMC

EPCAM Others Rat 大鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

大鼠食管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

OVCAR-3人卵巢癌細(xì)胞 Human ovarian cancer cell line OVCAR-3 1640+10%FBS

EREG Protein Mouse 重組小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 嬰兒真皮成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
SDS-PAGE 預(yù)制膠12 塊操作步驟LAIR2 Others Human 人 LAIR2 / CD306 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

ACHN, 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞

GBA3 Others Human 人 GBA3 / CBGL1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

SW579細(xì)胞，人甲狀腺癌細(xì)胞 人鼻咽癌細(xì)胞系,HNE2-LMP1細(xì)胞 CL-0363Hs68(人男性正常細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA

Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293sars181A