當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>RNA/DNA提取>>蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品>> 亞氨二乙酸介質(zhì)10mL操作步驟
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更新時間:2017-07-19 14:59:01瀏覽次數(shù):100次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)小鼠內(nèi)皮細(xì)胞分離液 1.071200mL操作步驟
小鼠腫瘤細(xì)胞分離液 1.070200mL售后服務(wù)
亞氨二乙酸介質(zhì)10mL操作步驟對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
亞氨二乙酸介質(zhì)10mL操作步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1. 一站式,即開即用,用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍(lán)色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗(yàn)。
亞氨二乙酸介質(zhì)10mL操作步驟詳細(xì)說明書:
亞氨二乙酸介質(zhì)10mL操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
D-絲酸甲酯鹽酸鹽100克
PHA-P 5mg/10mg Sigma分裝
松油醇,英文名或英文縮寫:Terpineol,級別:AR,99%,規(guī)格:500克
三拂磺醋鋇 BcRIUM TRIFLUOROMqTHcNqSULFONcTq 794-60-7
化四甲基,英文名或英文縮寫:Tetrametxylammonium iodide,級別:AR,98%,規(guī)格:1克
兔肌動蛋白,英文名或英文縮寫:Actin from rabbit muscle,級別:B,75u/mg,規(guī)格:50毫克
拂化鋅 Zinc fluoridq 7783-49-2
metxyl 3-chlorothiopxene-2-carboxylate 88105-17-3
2,3-二溴丙酸乙酯 Ethyl 2,3-dibromopropionate,97% 3674-13-3 25G 通用試劑
十二烷基苯磺酸鈉/Sodium dodecylbenzenesulfonate AR,90%, 250克 國產(chǎn)
ACESACES高純級白色結(jié)晶粉末RTsigma
X-GlucNa 10mg原裝/100mg原裝 INALCO1758-0700
Taq酶shēng huà shì jì容量:100克
4-溴本迷;隊(duì)溴本迷;1-溴-4-氧基本;隊(duì)溴茴香迷 4-BroMocnisolq;p-BroMocnisolq;1-BroMo-4-Mqthoxybqnzqnq;p-BroMophqnol Mqthyl qtqr 104-9-7
N-羥基琥珀酰亞胺*shēng huà shì jì容量:保存:-20℃100毫克
IL13 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL-13 / Interleukin-13 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞裂解物HUMSCL
BABL/3T3 BABL/C小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
CL-0182P815(小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)
人整合SV40基因的上皮細(xì)胞;HBL-100 [HBL100] 人腎動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞裂解物HUMSCL
IL13 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL-13 / Interleukin-13 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
BABL/3T3 BABL/C小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
CL-0182P815(小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)
人整合SV40基因的上皮細(xì)胞;HBL-100 [HBL100] 人腎動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
亞氨二乙酸介質(zhì)10mL操作步驟GNM(人口腔鱗癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0320BC3H1(小鼠腦瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 小型豬腎細(xì)胞;MPK
小鼠肺腺癌細(xì)胞系;LA795
CRELD1 Others Human 人 CRELD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
SF17細(xì)胞,人腦瘤細(xì)胞 洋蔥假單胞菌 人角膜細(xì)胞總RNAHK tRNA
RL1(大鼠肺成纖維樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
SH-SY5Y人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 SH-SY5Y human neuroblastoma cells MEM/F-12(1:1)+10%FBS
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