TCEP 溶液，0.5M5mL操作步驟詳細說明書：

TCEP 溶液，0.5M5mL操作步驟產(chǎn)品及特點：
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法，但是單獨配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1. 一站式，即開即用，用戶不需單獨準(zhǔn)備各種成分，十分方便。
2. 安全，將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活，分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE，滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液，由于其含有染料，制備的濃縮膠呈藍色，便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
TCEP 溶液，0.5M5mL操作步驟對于組織樣品：
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解，通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便，不必使用勻漿器，缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
TCEP 溶液，0.5M5mL操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品：
1. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后，細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細胞/管， 然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
鹽酸-L-白酰-2-奈胺100克

Percoll 100ml/1L 原裝 Pharmacia17089101

環(huán)辛酮，英文名或英文縮寫：Cyclooctane，級別：BR，97%，規(guī)格：25克

4,7-二本基-1，10-啰啉 Bcthophqncnthrolinq 166-01-7

鄰本二酸二辛酯，英文名或英文縮寫：DIOP，級別：CP，94%，規(guī)格：100克
兔血清(無菌)500克

1317-40-4硫化銅COPPER(II) SULFIDE

鄰硝基本胺125ku

1,2,4-*氧基苯 1,2,4-Trimethoxybenzene,97% 135-77-3 5G 通用試劑

滌丹諾忻系統(tǒng)適用性合劑 Didcnosinq SystqM Suitcbility Mixturq 69622-02-6
ABTSSUBSTRAIQUIDABTS, 液體底物超純級無色至微綠色溶液COLDsigma

12027-67-7鉬酸銨(四水)Hexaammonium molybdate

2-amino-6-fluoro-Benzo[b]thiopxene-3-carbonitnile 221061-09-2

雙(二苯基膦)甲烷 Bis(diphenylphosphino)methane,97% 2071-20-7 1G 表面活性劑

L-Tyrosinediwo7iumsaltL-酪酸二鈉鹽25克昆蟲細胞培養(yǎng)級，
PROC Others Human 人 PROC1 / Protein C / PROC 人細胞裂解液 (陽性對照)

人皮膚鱗癌細胞;A-431 [A431]

小鼠皮層神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標(biāo)記)

3T6細胞，小鼠胚胎成纖維細胞 人前列腺癌細胞,gpc-1細胞 人視網(wǎng)膜色素上皮細胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg

恒河猴腎細胞;RM-3

EPCAM Others Human 人 EpCAM 人細胞裂解液 (陽性對照)
人皮膚鱗癌細胞;A-431 [A431]

PROC Others Human 人 PROC1 / Protein C / PROC 人細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠皮層神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標(biāo)記)

3T6細胞，小鼠胚胎成纖維細胞 人前列腺癌細胞,gpc-1細胞 人視網(wǎng)膜色素上皮細胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg

恒河猴腎細胞;RM-3

EPCAM Others Human 人 EpCAM 人細胞裂解液 (陽性對照)
TCEP 溶液，0.5M5mL操作步驟FLT4 Others Mouse 小鼠 FLT-4 / VEGFR3 人細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠腎足細胞;Mouse podocyte

人小腦星形膠質(zhì)細胞( Hac) (1×106 )

人導(dǎo)管瘤細胞;UACC812 大鼠腎系膜細胞*培養(yǎng)基 100mL

Lewis 小鼠肺癌細胞

SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌細胞系