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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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DTT,蛋白級5g說明書

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更新時間:2017-07-19 14:53:36瀏覽次數(shù):150次

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DTT,蛋白級5g說明書如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

DTT,蛋白級5g說明書詳細說明書:

DTT,蛋白級5g說明書產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
DTT,蛋白級5g說明書對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
DTT,蛋白級5g說明書對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
胰胨大豆胨固綠瓊脂shēng huà shì jì容量:100毫升

(牛肉蛋白胨)

TEBUFFERPH7.0TE緩沖液012x1MLFrozen

N,N-二羌基甘安醋 (BICINE) Bicinq 120-2-4

BISTRISPROPAnepIS TRIS 丙烷高純級100G
豚鼠血清(無菌)shēng huà shì jì容量:RT5

52645-53-1二錄本醚菊酯Permetxrin

2-nepxtxelenecarboxylic acid, 1,2,3,4-tetraxy7no-8-metxoxy-4-oxo 16035-97-5

4-溴吲哚 4-Bromoindole,98.0 % 52488-36-5 250MG 多肽試劑

無水錳25
ABTSDIAMMONIUMSALTABTS, 二鹽超純級淺綠色精細粉末FROZENsigma

1999-4-7;3-甲基本;間叨;間酸M-Toluic acid;M-Toluylic acid

1克保存:-20

2- 2-Chloro,99% 612-62-4 1G 通用試劑

2--3-甲氧基苯硼酸 2-Fluoro-3-methoxyphenylboronic acid 352303-67-4 1G 通用試劑
人腸平滑肌細胞(HISMC)( 5×105 )

人皮膚成纖維樣細胞;HSF2

CL-0366IAR20(大鼠肝細胞)5×106cells/瓶×2

人肺癌細胞;A-427 [A427] 大鼠破骨細胞*培養(yǎng)基 100mL

EL4.IL-2 小鼠淋巴瘤細胞

MET Others Mouse 小鼠 c-MET / HGFR 人細胞裂解液 (陽性對照)
人皮膚成纖維樣細胞;HSF2

人腸平滑肌細胞(HISMC)( 5×105 )

CL-0366IAR20(大鼠肝細胞)5×106cells/瓶×2

人肺癌細胞;A-427 [A427] 大鼠破骨細胞*培養(yǎng)基 100mL

EL4.IL-2 小鼠淋巴瘤細胞

MET Others Mouse 小鼠 c-MET / HGFR 人細胞裂解液 (陽性對照)
DTT,蛋白級5g說明書CD200R4 Others Mouse 小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 人細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠T淋巴細胞;Cl.Ly1+2-/9

EPHB1 Others Human EphB1 / EPHT2 (aa 565-984) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細胞-骨髓 小鼠精母細胞,GC-2spd細胞 Mv.1.Lu(NBL-7)(貂肺上皮細胞)

人類原巨核細胞型白血病細胞;UT-7

SP2/0, 小鼠骨髓瘤細胞

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