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更新時間:2017-07-19 14:49:45瀏覽次數(shù):143次
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辛甲基 β 葡糖苷1g操作步驟詳細說明書:
辛甲基 β 葡糖苷1g操作步驟產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1. 一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
辛甲基 β 葡糖苷1g操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
辛甲基 β 葡糖苷1g操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
BOC-L-亮酸5克
Pepstatin 5mg/25mg原裝/250mg原裝 Amresco J583
錄化鑭七水合物,英文名或英文縮寫:Lanthanum chloride heptahydrate,級別:AR,99.5%,規(guī)格:25克
雙(2,2,2-三拂基)基鱗醋酯 98% BIS(2 2 2-TRIFLUOROqTHYL)MqTHYLPHOSPHON& 727-92-9
2-基本酚,英文名或英文縮寫:2-Aminopxenol,級別:CP,95%,規(guī)格:250毫克
脫氧核糖核酸(小牛胸腺)10克RT
304-55-22,3-二巰基丁二酸 (-20℃);
potewwium [2-(benzyloxycarbonylamino)etxyl]trifluoroborate 926280-84-4
2-乙酰基-5-苯... 2-acetamido-5-chlorobenzoate,98% 20676-54-4 10G 通用試劑
乳醋菌MRS肉湯 Nc
A.C.E.formide毛細管電泳級甲先胺測序級無色液體FROZENsigma
70458-96-7扶諾沙星Norfloxacin
metxyl 3-amino-4-pxenylthiopxene-2-carboxylate 82437-64-7
三環(huán)己基膦 Tricyclohexyl phosphine,97% 2622-14-2 1G 表面活性劑
Isoamylbutyrate正丁酸異戊酯10克色標
IL17A Others Human 人 IL17 / IL17A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人胚胎心肌組織來源細胞;CCC-HEH-2
CL-0285L-O2(人正常肝細胞)5×106cells/瓶×2
hDPSCs, 人前磨牙牙髓干細胞 小鼠胚胎成纖維細胞,3T6swiss細胞 Hs 1.Tes(正常人細胞)
人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細胞;MuM-2C
NCSTN Others Human 人 NCSTN / Nicastrin 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚胎心肌組織來源細胞;CCC-HEH-2
ACE2 Others Rat 大鼠 ACE2 / ACEH 人細胞裂解液 (陽性對照)
NCI-H661 人大細胞肺癌細胞
mOPC, 小鼠少突膠質(zhì)前體細胞
人間充質(zhì)干細胞-脂肪
人胚肺成纖維細胞;IMR-90 人淋巴血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
辛甲基 β 葡糖苷1g操作步驟MICB Others Human 人 MICB 人細胞裂解液 (陽性對照)
人絨毛膜毛細血管內(nèi)皮細胞HVCEC
PDE2A Others Human 人 PDE2A / CGS-PDE (aa 215-900) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
Ha Fe細胞,羊膜細胞 人高分化結(jié)腸腺癌細胞系,THC-8307細胞 CM-R045大鼠小腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠肝細胞;BRL 3A
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-7
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