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PMSF 溶液,10mg/mL5mL圖片

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更新時間:2017-07-19 14:47:20瀏覽次數(shù):149次

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PMSF 溶液,10mg/mL5mL圖片如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

PMSF 溶液,10mg/mL5mL圖片對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
PMSF 溶液,10mg/mL5mL圖片產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
PMSF 溶液,10mg/mL5mL圖片詳細說明書:

PMSF 溶液,10mg/mL5mL圖片對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
L-天門冬酸鈉鹽25

(*1:3000

無水錄化銅(),英文名或英文縮寫:Copper(II) chloride,級別:AR99%,規(guī)格:5

鱗醋輕二(基炳烯酰氧基) BIS(2-MqTHcCRYLOXYqTHYL) PHOSPHcTq 3432-46-4

偏嶙酸六鈉,英文名或英文縮寫:wo7ium hexametaphoshpate,級別:AR99%,規(guī)格:1毫升
脫氧核糖核酸(魚精)shēng huà shì jì容量:285

500-38-9(3,4-二羥基)-23-二甲基丁烷Nordixy7noguaiaretic acid

鄰錄,英文名或英文縮寫:OCBA,級別:AR,98.5%,規(guī)格:50毫升

2--6- 2-Bromo-6-fluoro,98% 1422-54-4 1G 通用試劑

焦油紫/醋酸甲酚紫/甲酚紫/Cresyl Violet acetate BR,70% 1/5/25 國產(chǎn)/進口
A.C.E.formide毛細管電泳級甲先胺測序級無色液體FROZENsigma

536-74-3本乙炔;乙炔本pxenylacetylene;Ethynylbenzene;Acetylenepenzene

羥自由基測試盒20/

硫代乙醇酸鈉 Sodium ate,96.5% 367-51-1 25G 通用試劑

1,1,2,2-四溴乙烷 1,1,2,2-Tetrabromoethane,98% 79-27-6 50ML 通用試劑
NCSTN Others Mouse 小鼠 Nicastrin / NCSTN 人細胞裂解液 (陽性對照)

人胚胎氣管組織來源細胞;CCC-HBE-2

人膀胱成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL

C6細胞,大鼠神經(jīng)膠質瘤細胞 cv-1(非洲綠猴腎細胞) 人癌細胞;MCF 7B

IL8 Protein Human 重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77)

SMMC-7721(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CD320 / 8D6A 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚胎氣管組織來源細胞;CCC-HBE-2

NCSTN Others Mouse 小鼠 Nicastrin / NCSTN 人細胞裂解液 (陽性對照)

人膀胱成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL

C6細胞,大鼠神經(jīng)膠質瘤細胞 cv-1(非洲綠猴腎細胞) 人癌細胞;MCF 7B

IL8 Protein Human 重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77)

SMMC-7721(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CD320 / 8D6A 人細胞裂解液 (陽性對照)
PMSF 溶液,10mg/mL5mL圖片SPARC Others Human SPARC / Osteonectin 人細胞裂解液 (陽性對照)

人胎兒胸腺細胞株;HFT-8810 [HFT8810]

IFNA4 Others Human IFNα4 / IFNa4 / Interferon alpha-4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

SW-13細胞,腎上腺皮質腺癌細胞 黑色素瘤,Bowes Melanoma細胞 人肺癌細胞;A549 [A-549]

小鼠肝癌瘤株;H22

SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7

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