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AEBSF 溶液,10mg/mL5mL說(shuō)明書(shū)

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更新時(shí)間:2017-07-19 14:38:50瀏覽次數(shù):182次

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AEBSF 溶液,10mg/mL5mL說(shuō)明書(shū)如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過(guò)強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

AEBSF 溶液,10mg/mL5mL說(shuō)明書(shū)產(chǎn)品及特點(diǎn):
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1.
一站式,即開(kāi)即用,用戶(hù)不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開(kāi)提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿(mǎn)足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍(lán)色,便于上樣時(shí)識(shí)別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗(yàn)。
AEBSF 溶液,10mg/mL5mL說(shuō)明書(shū)對(duì)于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過(guò)強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
AEBSF 溶液,10mg/mL5mL說(shuō)明書(shū)對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒(méi)有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會(huì)被裂解。 2.2 對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
二乙?;淄椋⑽拿蛴⑽目s寫(xiě):2,4-Pentanedione,級(jí)別:BR,規(guī)格:2

PEG400 200g Sigma分裝

AMMONIUMSULFATE胺蛋白組學(xué)級(jí)1KG7783-20-2RT

四甘醇 Bis[2-(2-xy7noxyqthoxy)qthyl] qtqr 11-60-7

3-AminobutanoicacidDL-3-基正丁酸100BR,98%
網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)液shēng huà shì jì容量:1公斤

(牛肝))

Na-對(duì)磺酰-L-精酸甲酯鹽酸鹽250毫克

前列滌爾 clprostcdil 742-62-3

皇豆苷 Dcidzin 22-66-9
8-羥基鹽100RT

十四烷基二基下基錄化銨 (TDBAC) Tqtrcdqcyldimqthylbqnzylcmmonium chloridq 139-08-

4-Bromo-3-chloroaniline 21402-26-6

四五胺 (TEPA) Tetraethylenepentamine 112-57-2 100G 通用試劑

T7 RNA聚合酶/T7 RNA Polymerase BR,20u/ul 500u 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
TLR4 Others Human TLR4 / CD284 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]

CL-0331CTLL-2(小鼠T細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

BRL 3A, 大鼠肝正常細(xì)胞 人小細(xì)胞肺癌,NCI-H209細(xì)胞 HIT-T15(倉(cāng)鼠beta胰島細(xì)胞)

人導(dǎo)管癌細(xì)胞;HCC38

SERPINA3 Others Human SerpinA3 / AACT 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]

CD83 Others Mouse 小鼠 CD83 / HB15 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

NCI-H345(懸浮) 小細(xì)胞肺癌

NCI-N87 [N87]人胃癌細(xì)胞

人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92MI [NK92MI] 人前列腺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
AEBSF 溶液,10mg/mL5mL說(shuō)明書(shū)VCAM1 Others Mouse 小鼠 VCAM1 / CD106 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞cDNAHRCEpiC cDNA

PLK1 Others Mouse 小鼠 PLK1 / PLK-1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

SGC-7901細(xì)胞,胃腺癌細(xì)胞 人食管癌細(xì)胞,Eca-109細(xì)胞 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12]

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A5

tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類(lèi));P19-CAG-tTA-1F3

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