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酵母蛋白酶抑制劑1mL說明書

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更新時間:2017-07-19 14:37:02瀏覽次數(shù):179次

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酵母蛋白酶抑制劑1mL說明書如果組織樣品本身非常細小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

酵母蛋白酶抑制劑1mL說明書產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
酵母蛋白酶抑制劑1mL說明書對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
酵母蛋白酶抑制劑1mL說明書對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
2-羥基-2-甲基丙酸,英文名或英文縮寫:α-xy7noxyisobutyric acid,級別:色固,規(guī)格:100

PEG20000 250g/500g/1kg/5kg 原裝 Merck 818897

TBS/TWEEN20BUFFER,20XTBS 吐溫 20 緩沖液, 20X生物技術(shù)級500MLRT

BisMuth 7440-69-9

4-Fluorobenzoicacid對扶本酸50毫克高純,99%
微晶纖維素shēng huà shì jì容量:100

59-48-52,4-二硝基酚(劇毒)()2,4-pxenol

嶙酰二肽25

α-溴丁醋酯 2-Bromobutyric ccid mqthyl qstqr 3196/12/4

BOC-L-本丙醇100
8-xy7noxyinoneoline8-氫氧化100毫克CP,98.5%

3081-61-6L-茶酸L-Theanine

N-nitnosodietxylamineN-二乙基亞硝胺5BR,98%

1-甲基 1-Methylpiper 109-01-3 100ML 通用試劑

瓊脂糖凝膠 Sepharo... Sepharose CL-2B 65099-79-8 250ML 通用試劑
ADAM9 Others Mouse 小鼠 ADAM9 人細胞裂解液 (陽性對照)

人胚腎細胞(亞系克隆);FIP293

HCC827 人非小細胞肺癌細胞

2V6.11人胚腎細胞 Human embryonic kidney cell line 2V6.11 MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS

TNF Protein Ferret 重組雪貂 TNF-alpha / TNFA 蛋白

人成纖維細胞(HMF)(5×105) HuH-7人肝癌細胞 Human
人胚腎細胞(亞系克隆);FIP293

ADAM9 Others Mouse 小鼠 ADAM9 人細胞裂解液 (陽性對照)

HCC827 人非小細胞肺癌細胞

2V6.11人胚腎細胞 Human embryonic kidney cell line 2V6.11 MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS

TNF Protein Ferret 重組雪貂 TNF-alpha / TNFA 蛋白

人成纖維細胞(HMF)(5×105) HuH-7人肝癌細胞 Human
酵母蛋白酶抑制劑1mL說明書IL32 Others Human Interleukin-32 / IL-32 (isoform alpha) 人細胞裂解液 (陽性對照)

視網(wǎng)膜色素上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

GRK6 Others Human GRK6 / GPRK6 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

SH-SY5Y細胞,神經(jīng)母細胞瘤細胞 人膽囊癌細胞,GBC-SD細胞 CL-0048Ca Ski(人上皮細胞)5×106cells/瓶×2

APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細胞株;7WCY1.0

tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B);Pan02-CAG-tTA-4B3

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