蛋白磷酸酶抑制劑混合液 11mL操作步驟詳細說明書：

蛋白磷酸酶抑制劑混合液 11mL操作步驟產(chǎn)品及特點：
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法，但是單獨配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1. 一站式，即開即用，用戶不需單獨準備各種成分，十分方便。
2. 安全，將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活，分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE，滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液，由于其含有染料，制備的濃縮膠呈藍色，便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
蛋白磷酸酶抑制劑混合液 11mL操作步驟對于組織樣品：
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小，可以適當剪切后直接加入裂解液裂解，通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便，不必使用勻漿器，缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
蛋白磷酸酶抑制劑混合液 11mL操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品：
1. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后，細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細胞/管， 然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
NONIDETP-40SUBSTITUTENP-40 替代物蛋白組學級100ML9002-93-1RT

(果膠)

液體生物防腐劑，英文名或英文縮寫：Proclin 300，級別：AR，99%，規(guī)格：25克

次碳醋鉍;減式碳醋鉍;碳醋氧鉍;碳醋鉍 BisMuth subccronctq;BisMuth(III) ccronctq bcsic;BisMuth oxyccronctq 289-10-4

磺酸，英文名或英文縮寫：Sulfamic acid，級別：BR，97%，規(guī)格：500克
微孔濾膜(混纖)shēng huà shì jì容量：保存：-20℃25毫克

111-61-5硬脂酸乙酯;十八酸乙酯etxyl stearate;Octadecanoic acid etxyl ester;

代醋酸，英文名或英文縮寫：Iodoacetic acid，級別：BR，325目，規(guī)格：5克

5-溴-2-基 5-Bromo-2-pyridinecarbonitrile,97% 97483-77-7 1G 通用試劑

測試盒/H2O2測試盒 比色法 50管/48樣 國產(chǎn)
7-基-4-甲基100KU

三十七烷醋甘油酯(-20℃) TRIHqPTcDqCcNOIN 438-40-6

3-Fluoro-6-picoline 31181-53-0

(R)-4-芐基-2-惡唑... (R)-4-Benzyl-2-oxazolidinone,99% 102029-44-7 1G 通用試劑

葡萄糖酸鉀/葡糖酸鉀鹽/Potassium gluconate AR，99 100克 國產(chǎn)/進口
大鼠小腦星形膠質細胞(RAc)(5×105)

人胚皮膚成纖維細胞;CCC-ESF-1

非洲綠猴腎細胞(SV40轉化);COS-1 [COS1]

KM小鼠子瘤株;U27 小鼠前列腺上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

mCF, 小鼠心臟成纖維細胞 Mouse

CD200R1L Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200Rla 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚皮膚成纖維細胞;CCC-ESF-1

大鼠小腦星形膠質細胞(RAc)(5×105)

非洲綠猴腎細胞(SV40轉化);COS-1 [COS1]

KM小鼠子瘤株;U27 小鼠前列腺上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

mCF, 小鼠心臟成纖維細胞 Mouse

CD200R1L Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200Rla 人細胞裂解液 (陽性對照)
蛋白磷酸酶抑制劑混合液 11mL操作步驟Hacat(人永生化角質形成細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0352HFF-1(人成纖維細胞)5×106cells/瓶×2 白牦牛皮膚細胞;Yak-2

小鼠T淋巴細胞瘤細胞;Cyc-Tag(S49)

CD40 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CD40 / TNFRSF5 人細胞裂解液 (陽性對照)

U251細胞，人神經(jīng)膠質瘤細胞 近平滑假絲酵母 人海馬趾神經(jīng)元RNAHN-h miRNA5 μg

RT4(人膀胱移行細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

U251人膠質瘤細胞 Human glioma cell line U251 DMEM+10% FBS