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考馬斯亮藍 G-25010g操作步驟

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更新時間:2017-07-19 14:22:32瀏覽次數(shù):204次

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考馬斯亮藍 G-25010g操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

考馬斯亮藍 G-25010g操作步驟產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
考馬斯亮藍 G-25010g操作步驟詳細說明書:

考馬斯亮藍 G-25010g操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
考馬斯亮藍 G-25010g操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
RNAELECTROPHORESISKITRNA電泳試劑盒01 KitRT

(營養(yǎng)肉湯)

食用色素亮藍,英文名或英文縮寫:Erioglaucine diwo7ium salt,級別:BS84%,規(guī)格:5

縮二脲;安基酰脲;安縮脲;二縮脲 Biurqt;cllophcMic ccid cMidq;CcrbcMylurqc;IMidodiccrbonic dicMidq 108-19-0

四羥酮醇S,英文名或英文縮寫:Thioflavine S,級別:BR,470/570NM,規(guī)格:25
微量可調(diào)移液器P2.51

7440-5-3PalladiuM

正嶙酸鐵四水物shēng huà shì jì容量:100

2,6-二酚 2,6-,99% 576-26-1 100G 通用試劑

*;;;4-O-β-D-半乳糖基-4-D-呋喃果糖 Lcctulosq;4-O-β-D-Glcctosyl-D-fructosq;Lcqvilcc 4618-18-
6-巰基嘌呤一水合物shēng huà shì jì容量:2810

117467-28-4*Cefditoren Pivoxil

2-Chloro-3-metxylpyridine-5-boronic acid pinacol ester 1010101-07-1

丙位癸內(nèi)酯 γ-Decanolactone,97.0% 706-14-9 25ML 通用試劑

吐溫85/吐混85/聚氧山梨糖醇酐三油酸酯/聚乙氧基三油酸清涼茶醇/聚氧失水*三油酸酯/乳化劑T85/Tween 85 CP 5
FCRL1 Others Mouse 小鼠 FCRL1 / FCRH1 人細胞裂解液 (陽性對照)

人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38]

人腎成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL

P19細胞,小鼠畸胎瘤細胞 MCF7(癌細胞) 人橫紋肌肉瘤細胞;A-204

CCL5 Protein Human 重組人 CCL5 / RANTES 蛋白 (His & mucin 標簽)

SK-OV-3(人卵巢癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Alpha 1 Antitrypsin / SerpinA1a 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38]

TMEM27 Others Human TMEM27 人細胞裂解液 (陽性對照)

F344大鼠骨髓間質(zhì)干細胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cells

HME2細胞,人黑色素瘤細胞 干酪乳桿菌干酪亞種 人癌細胞;MCF7

USMC(大鼠血管平滑肌細胞) 5×106cells/瓶×2

IBRS-2(豬腎細胞) 5×106cells/瓶×2 Caki-1, 人腎透明細胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細胞 人骨肉瘤細胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS]
考馬斯亮藍 G-25010g操作步驟GB Others Cytomegalovirus/CMV 巨細胞病毒 HCMV gB 人細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-C2

IL18R1 Others Rat 大鼠 IL18R1 人細胞裂解液 (陽性對照)

PAN-1細胞,胰腺導管上皮癌細胞 人細胞,HeLa-S3細胞 人小腦顆粒細胞總RNAHCGC tRNA

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-7

膀胱癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml

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