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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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福林酚試劑100mL操作步驟

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更新時間:2017-07-18 16:36:12瀏覽次數(shù):333次

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福林酚試劑100mL操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

福林酚試劑100mL操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
福林酚試劑100mL操作步驟產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
福林酚試劑100mL操作步驟詳細說明書:

福林酚試劑100mL操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
WESTERNMAX,HRPCHROMKIT,RABBIT辣根酶發(fā)光檢測試劑盒,01 KitCOLD

(十二烷基肌酸鈉)

溶劑紅19,英文名或英文縮寫:Sudan red 7B,級別:BR98%,規(guī)格:25

N-叔丁氧羰基-N--L-炳安醋 BOC-N-Mqthyl-L-clcninq 16948-16-6

血晶素,英文名或英文縮寫:Hematin chloride,級別:IND,規(guī)格:25
微量可調(diào)移液器P5000shēng huà shì jì容量:保存:-201

993-50-0(二甲基基甲基)二茂絡(luò)鐵(DImetxYLAMINO)TRImetxYLTIN

錄化鎘,英文名或英文縮寫:Cadmium chloride,級別:CP,98.0%,規(guī)格:100毫克

乙酸鉛(II) ,三水 Lead acetate trihydrate 6080-56-4 25G 通用試劑

 Vinyl chloride,99.5% 1975-1-4 1ML 通用試劑
6-嶙酸葡萄糖鋇鹽5

Bis-TrisPropane 5g/25g/500g原裝 Sigma B6755

優(yōu)錄凈,英文名或英文縮寫:wo7ium dichloroisocyanurate,級別:AR99.5%,規(guī)格:25

水合五錄銠醋銨 cMMONIUM cQUcPqNTcCHLORORHODcTq(III) 63771-33-2

二錄異三聚青醋內(nèi)鹽 Dichloroisocycnuric ccid wo7ium sclt;Dichloroisocycnuric ccid,Nc sclt 893-7
KLRB1F Others Mouse 小鼠 KLRB1F / NKR-P1F 人細胞裂解液 (陽性對照)

人胚肺成纖維細胞;MRC-5

HCT-8 人回盲腸癌細胞

786-O [786-0]人腎透明細胞腺癌細胞 786-O [786-0] human renal clear cell carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

TNF Protein Canine 重組狗 TNF-alpha / TNFA / TNFSF1A 蛋白

大鼠中腦縫神經(jīng)細胞(腦脊)(RNr)(1×106) WM35, 人黑色素瘤細胞 Human
人胚肺成纖維細胞;MRC-5

SDC4 Others Mouse 小鼠 Syndecan-4 / SDC4 人細胞裂解液 (陽性對照)

HCCC-9810 人膽管細胞型肝癌細胞

293 Cells, low passage人胚腎細胞 293 Cells, low and passage in human embryo kidney cell 人胚腎細胞

LTA Protein Human 重組人 TNF-beta / TNFSF1 / Lymphotoxin alpha 蛋白

人臍帶動脈內(nèi)皮細胞 (HUAEC)( 5×105 ) A549, 人肺癌細胞系 Human
福林酚試劑100mL操作步驟AMICA1 Others Human JAML / AMICA 人細胞裂解液 (陽性對照)

人臍動脈內(nèi)皮細胞總RNAHUAEC tRNA

DDC Others Mouse 小鼠 DOPA Decarboxylase / DDC 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

GBC-SD細胞,膽囊癌細胞 *系,WI-38細胞 小鼠小膠質(zhì)細胞;BV2

小鼠骨髓瘤細胞;P3/NSI/1-Ag4-1

豹貓皮膚成纖維樣細胞;LCS5

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