一站式 MBP 標(biāo)簽蛋白純化套裝20 次操作步驟詳細(xì)說明書：

一站式 MBP 標(biāo)簽蛋白純化套裝20 次操作步驟產(chǎn)品及特點(diǎn)：
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法，但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1. 一站式，即開即用，用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分，十分方便。
2. 安全，將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活，分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE，滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液，由于其含有染料，制備的濃縮膠呈藍(lán)色，便于上樣時(shí)識(shí)別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗(yàn)。
一站式 MBP 標(biāo)簽蛋白純化套裝20 次操作步驟對(duì)于組織樣品：
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解，通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便，不必使用勻漿器，缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
一站式 MBP 標(biāo)簽蛋白純化套裝20 次操作步驟對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品：
1. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對(duì)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后，細(xì)胞就會(huì)被裂解。 2.2 對(duì)于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管， 然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
GENEPAGEPLUS5.25%6MUREA*CLDPAK5.25% GENE PAGE PLUS, 6M 尿素生物技術(shù)級(jí)100MLCOLD

Nicotinicacid 25g/100g/500g/1kg原裝 Sigma N4126

對(duì)藍(lán)，英文名或英文縮寫：BCIP，級(jí)別：CP，98.5%，規(guī)格：1毫克

硼完四輕呋喃溶液(+4℃) Borcnq-tqtrcxy7nofurcn complqx 14044-62-6

兒價(jià)分桔黃四鈉，英文名或英文縮寫：xyleol Orange tetrawo7ium salt，級(jí)別：高純，規(guī)格：5克
微球菌粉96支/盒RT

16919-58-7錄鉑酸銨Ammonium chloroplatinate

無水錄化鈣5克RT，避光

安息香 Benzoin ethyl ,97% 574-09-4 25G 通用試劑

偶氮膦Ⅲ/偶氮磷Ⅲ/膦酸偶氮III/2，7-雙(4--2-膦羧苯偶氮)-1，8-二羥基-3，6-二磺酸/CPA-Ⅲ 顯色劑 1克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
6-甲基25克

(3-7萬(wàn))(多聚-L-賴酸)

洋橄欖油，英文名或英文縮寫：Olive oil，級(jí)別：BR，97%，規(guī)格：5克

6-鱗醋-葡萄糖醋-三內(nèi)鹽(-20℃) 6-PHOSPHOGLUCONIC cCID TRIwo7ium ScLT 23411-70-4

N-乙酰本，英文名或英文縮寫：Acetanilide，級(jí)別：CP，規(guī)格：5克
FCER2 Others Mouse 小鼠 FCER2A / CD23 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人胚肺成纖維細(xì)胞;IMR-90

NCI-H358 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

LX-2, 人肝星形細(xì)胞株

人臍靜脈平滑肌細(xì)胞

人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC-C 人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人胚肺成纖維細(xì)胞;IMR-90

COLEC12 Others Rat 大鼠 CLP1 / COLEC12 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0323BNL 1ME A.7R.1(小鼠肝上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

HK-2, 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞 人惡性多發(fā)性畸胎瘤細(xì)胞，NTERA-2細(xì)胞 Beta-TC-6(小鼠胰腺癌beta細(xì)胞)

人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞;M619

CD200R1 Others Human 人 CD200R1 / CD200R 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
一站式 MBP 標(biāo)簽蛋白純化套裝20 次操作步驟HWP-c subcutaneous 人類白前脂肪細(xì)胞(HWP)皮下 500,000cells 人淋巴成纖維細(xì)胞HLF

786-O [786-0], 人腎透明腺癌細(xì)胞

CD300LG Others Human 人 CLM-9 / TREM4 / CD300LG 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

KC細(xì)胞，人腎癌細(xì)胞 小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞,Neuro-2a[N2a;Neuro-2a]細(xì)胞 CL-0373KiMA(人胚腎上皮細(xì)胞系)5×106cells/瓶×2

BGC-803(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

表達(dá)SV40T和EBNA1的人胚腎細(xì)胞;293ET