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鎳柱介質(zhì)2mL說明書

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更新時間:2017-07-18 16:28:59瀏覽次數(shù):146次

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鎳柱介質(zhì)2mL說明書如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

鎳柱介質(zhì)2mL說明書對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
鎳柱介質(zhì)2mL說明書產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍(lán)色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
鎳柱介質(zhì)2mL說明書詳細(xì)說明書:

鎳柱介質(zhì)2mL說明書對于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
十四酸,英文名或英文縮寫:Myristic acid,級別:BR50%,規(guī)格:25

NBT 200mg/1g Amresco分裝

SDS10%SDS溶液超純級100MLRT

三溴化硼;溴化硼 Boron tribroMidq 1094-33-4

Carbolfuchsin石炭酸品紅1FMP84%
維生素B3/*/菸酸/3-羧酸/-3-羧酸/3-噼啉酸/-3-/3-羥酸/-3-羥酸/3-噼啉酸/尼克酸//氮苯酸-3//VB3 CP,99% 25 國產(chǎn)/進口

PHOSPHATEBUFFEREDSALINE(PBS)20XCONCENTRATE,pH7.5PBS溶液超純級透明無混濁液體RTsigma

帕拉派克 N PORcPcK N (100-200 MqSH cSTM) FOR GC 37311-02-0

乙酸鋰/醋酸鋰/二水醋酸鋰/Lithium acetate dihydrate AR,9
5-溴水楊酸,英文名或英文縮寫:5-Bromosalicylic acid,級別:CP,規(guī)格:500毫克

硅同 DC-702 Siliconq DC-702

9H-Fluorene, 9-butyl- 3952-42-9

異佛爾酮二胺 3-Aminomethyl-3,5,5-trimethylcyclohexy... 2855-13-2 100ML 通用試劑

DEAE葡聚糖/DEAE Dextran 高純,分子量50 10 國產(chǎn)/進口
小鼠條紋神經(jīng)細(xì)胞(MN-s)(1×106)

人腦血管平滑肌細(xì)胞RNAHBCSMC miRNA5 μg

狗腎細(xì)胞;Super Tube

小鼠T淋巴瘤細(xì)胞(OVA基因修飾);E.G7-OVA 小鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

CHO, 中國倉鼠卵巢細(xì)胞系 其它

TNFRSF9 Others Human 4-1BB / CD137 / TNFRSF9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
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鎳柱介質(zhì)2mL說明書EPHB2 Others Human EphB2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人前脂肪細(xì)胞-皮下HPA-s

ERN1 Others Human ERN1 / IRE1 (aa 465-977) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

HL-7702細(xì)胞,肝細(xì)胞 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞,LS180細(xì)胞 CM-R037大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

大鼠肺泡巨噬細(xì)胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]

長尾綠猴胚胎細(xì)胞;4179

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