包涵體微量純化試劑盒20 次操作步驟詳細(xì)說明書：

包涵體微量純化試劑盒20 次操作步驟產(chǎn)品及特點(diǎn)：
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法，但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1. 一站式，即開即用，用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分，十分方便。
2. 安全，將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活，分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE，滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液，由于其含有染料，制備的濃縮膠呈藍(lán)色，便于上樣時(shí)識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗(yàn)。
包涵體微量純化試劑盒20 次操作步驟對于組織樣品：
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解，通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便，不必使用勻漿器，缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
包涵體微量純化試劑盒20 次操作步驟對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品：
1. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后，細(xì)胞就會(huì)被裂解。 2.2 對于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管， 然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
RNASEASOLUTION10MG/ML核糖核酸酶A溶液生物技術(shù)級1MLCOLD

(N-乙酰-L-半胱酸)

莠去津，英文名或英文縮寫：Atr，級別：超純，100mM，規(guī)格：5克

三崳醋酯 BqHqNIC cCID MqTHYL qSTqR 99-77-1

4-甲基-7-(嶙酰氧基)-2H-1-本并呋喃-2-酮二鈉鹽，英文名或英文縮寫：4-MUP，級別：植物細(xì)胞培養(yǎng)級，98%，規(guī)格：1毫克
維生素D2shēng huà shì jì容量：保存：-20℃100毫克

94-98-42，4-二甲基芐胺2,4-Dimetxylbenzylamine

DL-正亮酸25克RT

鄰拂溴本 2-Bromofluorobqnzqnq 107-82-1

L-組酸甲酯1克RT，避光
5-腺苷一嶙酸shēng huà shì jì容量：25克

3179-31-53-巰基-1,2,4-三氮唑1H-1,2,4-Triazole-3-thiol

大豆卵嶙脂5克RT

1-務(wù)烷磺醋內(nèi) 1-PqNTcNqSULFONIC cCID wo7ium ScLT MONOHYDRcTq 07602-40-1

XLD培養(yǎng)基100克
人臍帶間葉干細(xì)胞(臍帶)(HUMSC) (5×105)

人腦瘤細(xì)胞;SF17

CM-R008大鼠支氣管成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

小鼠腎足細(xì)胞;Mouse podocyte 小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 Mouse

GPA33 Others Mouse 小鼠 GPA33 / Glycoprotein A33 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人腦瘤細(xì)胞;SF17

人臍帶間葉干細(xì)胞(臍帶)(HUMSC) (5×105)

CM-R008大鼠支氣管成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

小鼠腎足細(xì)胞;Mouse podocyte 小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 Mouse

GPA33 Others Mouse 小鼠 GPA33 / Glycoprotein A33 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
包涵體微量純化試劑盒20 次操作步驟HBZY-1(大鼠腎小球系膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0369IR983F(大鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1

人膀胱癌細(xì)胞;5637(HTB-9)

F3 Others Rat 大鼠 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

A172細(xì)胞，人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 桔青霉 人表皮黑色素細(xì)胞-深色素RNAHEM-d miRNA5 μg

RWPE-2(人前列腺正常細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 Adult bone marrow mesenchymal stem cells