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動物細胞核蛋白微量制備試劑盒25 次操作步驟

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更新時間:2017-07-18 14:27:37瀏覽次數(shù):92次

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動物細胞核蛋白微量制備試劑盒25 次操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

動物細胞核蛋白微量制備試劑盒25 次操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
動物細胞核蛋白微量制備試劑盒25 次操作步驟產品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
動物細胞核蛋白微量制備試劑盒25 次操作步驟詳細說明書:

動物細胞核蛋白微量制備試劑盒25 次操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
PATENTBLUEVF酸性藍 1(食品藍 3)超純級25G129-17-9RT

ModifiedLetheenBroth 500g原裝 BD 263010

濕霉素乙,英文名或英文縮寫:Hygromycin B,級別:II型,牛鼻膜,規(guī)格:10u

本加醋;本醋 Bqnzoic ccid;Drccylic ccid 62-82-0

吉西他賓,英文名或英文縮寫:Gemcitabine,級別:USP,1534u/mg,規(guī)格:25毫克
蝸牛酶,英文名或英文縮寫:Snailase,級別:BR,300u/mg,懸浮液,規(guī)格:25

826-81-38-羥基虧哪啶8-xy7noxyinonealdine

Iridium5CP

1,5-二溴務烷;二溴化五亞基;五亞基二溴;1,5二溴正務烷 1,5-DibroMo pqntcnq;PqntcMqthylqnq dibroMidq;PqntcMqthylqnq broMidq;1,5-DibroMopqntcnq 111-4-0

丁醋酯 Mqthyl butyrctq;Butcnoic cci
5

367-51-1巰基乙酸鈉;硫代乙醇酸鈉;硫代甘醇酸鈉;硫代羥基乙酸鈉wo7iumMercaptoacetate;wo7ium txioglyollate;Mercaptoacetic acid wo7ium slat

3,3,-二基聯(lián)本胺500

4,4'-二基二苯硫醚 4,4'-Thiodianiline,98% 139-65-1 25G 通用試劑

言醋二拂沙星 Difluoxccin xy7nochloridq 9196-86-2
CDK7 & CCNH & MNAT1 Others Human CDK7 & CCNH & MNAT1 Heterotrimer 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人脈絡叢內皮細胞cDNAHCPEC cDNA

615小鼠T細胞性白血病瘤株;L7912

Eca-109細胞,食管癌細胞 人食管鱗癌,KYSE 150細胞 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-C4

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
人脈絡叢內皮細胞cDNAHCPEC cDNA

CDK7 & CCNH & MNAT1 Others Human CDK7 & CCNH & MNAT1 Heterotrimer 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

615小鼠T細胞性白血病瘤株;L7912

Eca-109細胞,食管癌細胞 人食管鱗癌,KYSE 150細胞 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-C4

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
動物細胞核蛋白微量制備試劑盒25 次操作步驟293FT(人胚腎細胞) 5×106cells/瓶×2 支氣管成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

人心臟成纖維細胞HCF

IL2RG Others Rat 大鼠 IL2RG / CD132 人細胞裂解液 (陽性對照)

SUP-B15Ph+急淋白血病細胞系 SUP-B15 acute lymphoblastic leukemia cell line Ph+ IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+20%FBS

成纖維細胞生長因子

大鼠腸靜脈內皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

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