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更新時(shí)間:2017-07-18 13:20:09瀏覽次數(shù):333次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)X-Gal 干粉0.5g使用說明書詳細(xì)說明書:
X-Gal 干粉0.5g使用說明書產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。 DH10Bac 細(xì)胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個(gè) mini-F 復(fù)制子、*抗性基因、att Tn7 位點(diǎn)和 lac Zα-互補(bǔ)因子。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域,該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點(diǎn)所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重組臂,Tn7R 和 Tn7L 之間包含*抗性基因、昆蟲病毒多角體基因啟動(dòng)子、多克隆位點(diǎn)和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號(hào)。當(dāng)含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細(xì)胞后,發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞 Sf9 或 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲病毒。此外,DH10Bac 細(xì)胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實(shí)現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)現(xiàn)象,用于重組 bacmid 的藍(lán)白斑篩選。
X-Gal 干粉0.5g使用說明書規(guī)格及成分:
X-Gal 干粉0.5g使用說明書使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG。
2. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞為例。
3. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒,用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
4. 42℃熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個(gè)離心管中加入 900 μL 無菌的 SOC(不含抗生素),混勻后置于 37℃ 搖床, 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時(shí)。
6. 用 SOC 培養(yǎng)基進(jìn)行 10 倍梯度稀釋,如分成 3 個(gè)稀釋梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各個(gè)梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,倒置平板, 37℃培養(yǎng) 24-48 小時(shí)。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃,視平板上菌落生長情況決定去留。
PTPN2重組小鼠 PTPN2 / TC-PTP 蛋白 (aa 2-314, His 標(biāo)簽) Protein
RAD51同源物(RAD51)重組蛋白 Recombinant RAD51 Homolog (RAD51)
CD300LG重組人 CLM-9 / TREM4 / CD300LG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
KLK4 Protein Human 重組人 KLK-4 / Kallikrein-4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CD33 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 CD33 / Siglec-3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/reassortant/IVR-155) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
膜輔蛋白(MCP)重組蛋白 Recombinant Membrane Cofactor Protein (MCP)
COMP重組人 COMP 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
CLCF1重組人 NNT1 / CLCF1 / CLC 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
GBA3 Protein Human 重組人 GBA3 / CBGL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
二氫*脫氫酶(DLD)重組蛋白 Recombinant Dihydrolipoyl Dehydrogenase (DLD)
KLK4 Protein Human 重組人 KLK-4 / Kallikrein-4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
TNFSF13重組小鼠 TNFSF13 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
PPBP Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CTRL重組人 CTRL-1 / CTRL / Chymotrypsin-like protease 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
大鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)免疫試劑盒 Human cTn-T ELISA Kit
氧化型*(GSSG)含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
Ratmatrixmetalloproteinase4,MMP-4ELISA試劑盒大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanHemoglobinH,HbHELISA試劑盒人血紅蛋白H(HbH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanlipoproteinlipase,LPLELISAKit人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素11(IL-11)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat neurotrophin 3 (NT-3) ELISA Kit 大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒
Humanosteonectin,ONELISAKit 人骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
humancaspase4-apoptosis-relatedcysteinepeptidase,Casp4ELISA試劑盒人吡哆醛/吡哆醇維生素B6激酶(PDXK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因水稻LibertyLink62品系基因檢測試劑盒20次
humansimilartoRIKENcDNA4933429F08geneELISAKit人類似RIKENcDNA4933429F08基因ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
X-Gal 干粉0.5g使用說明書人糖原合成酶激酶(GSK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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