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更新時(shí)間:2017-07-18 13:15:35瀏覽次數(shù):202次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)衣霉素溶液 ,5mg/mL1mL使用說(shuō)明書(shū)
一站式 TA 克隆試劑盒 ( 含感受態(tài) )20 次*詳細(xì)說(shuō)明書(shū):
一站式 TA 克隆試劑盒 ( 含感受態(tài) )20 次*產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲(chóng)桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測(cè),本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。 DH10Bac 細(xì)胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個(gè) mini-F 復(fù)制子、*抗性基因、att Tn7 位點(diǎn)和 lac Zα-互補(bǔ)因子。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域,該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點(diǎn)所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重組臂,Tn7R 和 Tn7L 之間包含*抗性基因、昆蟲(chóng)病毒多角體基因啟動(dòng)子、多克隆位點(diǎn)和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號(hào)。當(dāng)含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細(xì)胞后,發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲(chóng)細(xì)胞 Sf9 或 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲(chóng)病毒。此外,DH10Bac 細(xì)胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實(shí)現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)現(xiàn)象,用于重組 bacmid 的藍(lán)白斑篩選。
一站式 TA 克隆試劑盒 ( 含感受態(tài) )20 次*規(guī)格及成分:
一站式 TA 克隆試劑盒 ( 含感受態(tài) )20 次*使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG。
2. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞為例。
3. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒,用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
4. 42℃熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個(gè)離心管中加入 900 μL 無(wú)菌的 SOC(不含抗生素),混勻后置于 37℃ 搖床, 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時(shí)。
6. 用 SOC 培養(yǎng)基進(jìn)行 10 倍梯度稀釋,如分成 3 個(gè)稀釋梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各個(gè)梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,倒置平板, 37℃培養(yǎng) 24-48 小時(shí)。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃,視平板上菌落生長(zhǎng)情況決定去留。
GAG-P24重組人類(lèi)免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group O, strain BCF06) (His 標(biāo)簽) Protein
TGF- BetaR1/ALK (TGF-beta receptor type I 0.5mgTGF- BetaR1/ALK (TGF-beta receptor type I) 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β受體1抗原
ADAM12重組人 ADAM12 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
KIRREL Protein Human 重組人 KIRREL1 / NEPH1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CSF3 Protein Human 重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b)
HA Protein H4N4 重組甲型流感 H4N4 (A/mallard duck/Alberta/299/1977) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
趨化因子C-C-基元配體14(CCL14)重組蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Ligand 14 (CCL14)
DCN重組人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CD1D & B2M重組人 CD1D & B2M Heterodimer 蛋白 Protein
AIMP1 Protein Human 重組人 AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
TGF- BetaR1/ALK (TGF-beta receptor type I 0.5mgTGF- BetaR1/ALK (TGF-beta receptor type I) 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β受體1抗原
KIRREL Protein Human 重組人 KIRREL1 / NEPH1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
GAG-P24重組人類(lèi)免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group O, strain BCF06) (His 標(biāo)簽) Protein
CSF3 Protein Human 重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b)
ADAM12重組人 ADAM12 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
大鼠*型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒 ,英文名: uPA ELISA Kit
人心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4ELISA檢測(cè)試劑盒Humancardiactranscriptionfactor-GATA4ELISAKit 96T/48T
魚(yú)多巴胺(DA)免疫試劑盒 Fish dopamine,DA ELISA kit
CLIAKitforPCT(HumanProcalcitonin)ELISAKit人降鈣素原規(guī)格:48T/96T
樹(shù)脂法DNA萃取試劑盒20次
ELISAKitC3b人補(bǔ)體片斷3b規(guī)格:48T/96T
小鼠白介素1β (IL-1β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat mammary carcinoma marker-ca153 -CA153ELISA 大鼠癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒
Humancalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit 人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumancardiactroponinⅠ,cTn-ⅠELISA試劑盒人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品35S基因檢測(cè)試劑盒20次
HumanSolubleClusterofdifferentiation21,sCD21ELISAKit人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
一站式 TA 克隆試劑盒 ( 含感受態(tài) )20 次*人未甲基化寡聚脫氧核苷酸(CpG-ODN)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人維生素K1(VK1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人維生素E(VE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人維生素D受體(VDR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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