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AH109 酵母感受態(tài)細胞10×100μL*

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更新時間:2017-07-18 13:11:03瀏覽次數(shù):168次

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AH109 酵母感受態(tài)細胞10×100μL*是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達 107CFU/μg。

AH109 酵母感受態(tài)細胞10×100μL*規(guī)格及成分:

AH109 酵母感受態(tài)細胞10×100μL*產(chǎn)品及特點:
本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達 107CFU/μg。 DH10Bac 細胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個 mini-F 復制子、*抗性基因、att Tn7 位點和 lac Zα-互補因子。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域,該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R Tn7L 同源重組臂,Tn7R Tn7L 之間包含*抗性基因、昆蟲病毒多角體基因啟動子、多克隆位點和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號。當含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細胞后,發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲細胞 Sf9 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲病毒。此外,DH10Bac 細胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補現(xiàn)象,用于重組 bacmid 的藍白斑篩選。
AH109 酵母感受態(tài)細胞10×100μL*使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin7 μ g/mL gentamicin10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal40 μg/mL IPTG。
2. 取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以 100 μL 感受態(tài)細胞為例。
3. 待感受態(tài)細胞融化后,向感受態(tài)細胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒,用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
4. 42熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個離心管中加入 900 μL 無菌的 SOC(不含抗生素),混勻后置于 37 搖床, 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時。
6. SOC 培養(yǎng)基進行 10 倍梯度稀釋,如分成 3 個稀釋梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 100 μL 的各個梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,倒置平板, 37培養(yǎng) 24-48 小時。 8. 保留剩余的菌液保存于 4,視平板上菌落生長情況決定去留。
HA重組甲型流感 H5N1 (A/Xinjiang/1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽) Protein

r-GST(Recombinant Glutathione S-T Ahents 0.1mgr-GST(Recombinant Glutathione S-T Ahents) 重組*轉(zhuǎn)移酶GST標簽蛋白

VCAM1重組人 VCAM-1 / CD106 蛋白 (His 標簽) Protein

KIAA1279 Protein Human 重組人 KIAA1279 蛋白

CSF2RA Protein Human 重組人 CSF2RA / GM-CSFR / CD116 蛋白 (Fc 標簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽)

信號素3C(SEMA3C)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 3C (SEMA3C)

PLAT重組人 tPA / PLAT 蛋白 (Fc 標簽) Protein

SSR1重組人 TRAP-alpha / SSR1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

MMP9 Protein Human 重組人 MMP-9 / CLG4B 蛋白
r-GST(Recombinant Glutathione S-T Ahents 0.1mgr-GST(Recombinant Glutathione S-T Ahents) 重組*轉(zhuǎn)移酶GST標簽蛋白

KIAA1279 Protein Human 重組人 KIAA1279 蛋白

HA重組甲型流感 H5N1 (A/Xinjiang/1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽) Protein

CSF2RA Protein Human 重組人 CSF2RA / GM-CSFR / CD116 蛋白 (Fc 標簽)

VCAM1重組人 VCAM-1 / CD106 蛋白 (His 標簽) Protein
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