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DB3.1 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL*

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更新時(shí)間:2017-07-18 13:04:34瀏覽次數(shù):168次

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DB3.1 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL*是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲(chóng)桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測(cè),本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。

DB3.1 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL*規(guī)格及成分:

DB3.1 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL*產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲(chóng)桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測(cè),本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。 DH10Bac 細(xì)胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個(gè) mini-F 復(fù)制子、*抗性基因、att Tn7 位點(diǎn)和 lac Zα-互補(bǔ)因子。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域,該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點(diǎn)所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R Tn7L 同源重組臂,Tn7R Tn7L 之間包含*抗性基因、昆蟲(chóng)病毒多角體基因啟動(dòng)子、多克隆位點(diǎn)和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號(hào)。當(dāng)含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細(xì)胞后,發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲(chóng)細(xì)胞 Sf9 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲(chóng)病毒。此外,DH10Bac 細(xì)胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實(shí)現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)現(xiàn)象,用于重組 bacmid 的藍(lán)白斑篩選。
DB3.1 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL*詳細(xì)說(shuō)明書:

DB3.1 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL*使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG
2. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞為例。
3. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒,用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
4. 42熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個(gè)離心管中加入 900 μL 無(wú)菌的 SOC(不含抗生素),混勻后置于 37 搖床, 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時(shí)。
6. SOC 培養(yǎng)基進(jìn)行 10 倍梯度稀釋,如分成 3 個(gè)稀釋梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 100 μL 的各個(gè)梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,倒置平板, 37培養(yǎng) 24-48 小時(shí)。 8. 保留剩余的菌液保存于 4,視平板上菌落生長(zhǎng)情況決定去留。
FCGRT & B2M重組食蟹猴 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein

MMP-13 (Matrix metalloproteinase 13 0.5mgMMP-13 (Matrix metalloproteinase 13) 基質(zhì)金屬蛋白酶13抗原

CLIC4重組人 CLIC4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

JAM3 Protein Human 重組人 JAM3 / JAM-C 蛋白

SEMA5A Protein Mouse 重組小鼠 Semaphorin 5A / SEMA5A 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

速激肽受體1(TACR1)重組蛋白 Recombinant Tachykinin Receptor 1 (TACR1)

IL27RA重組人 IL27Ra / TCCR / WSX1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

TNFRSF11A重組人 TNFRSF11A 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ADIPOQ Protein Human 重組人 CAMK1D / CKLiK 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
MMP-13 (Matrix metalloproteinase 13 0.5mgMMP-13 (Matrix metalloproteinase 13) 基質(zhì)金屬蛋白酶13抗原

JAM3 Protein Human 重組人 JAM3 / JAM-C 蛋白

FCGRT & B2M重組食蟹猴 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein

SEMA5A Protein Mouse 重組小鼠 Semaphorin 5A / SEMA5A 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CLIC4重組人 CLIC4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
大鼠乙酰*轉(zhuǎn)移酶(CHAT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人信號(hào)識(shí)別顆??贵w(SRP)免疫試劑盒 Human signal recognization particle antibody,SRP ELISA Kit

檸檬酸合酶(CS)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 10/9

Ratmacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISA試劑盒大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

humanguanylatenucleotidebindingprotein4,Gbp4ELISA試劑盒人鳥(niǎo)苷酸結(jié)合蛋白4(Gbp4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit人白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat heat shock protein 60 (Hsp-60) ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒

HumanphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit 人磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISA試劑盒人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

中量真菌/酵母細(xì)胞基因組DNA純化試劑盒10

HumanSolubleprotein-100S-100ELISAKitS100蛋白(S-100)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DB3.1 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL*人*α1(Thymosinα1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人*(Thymosin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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